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zhiqiang2013新蟲 (初入文壇)
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[交流]
細胞培養(yǎng)，這22個細節(jié)一定要注意�。ㄒ唬�
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養(yǎng)細胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細對待，愛護她，呵護她。如果你照顧的時候能注意這些問題，會讓你的細胞養(yǎng)的更好。下面小編就將養(yǎng)細胞的注意事項跟大家交流一下。 細胞培養(yǎng)前的準備 在您帶上手套開始細胞培養(yǎng)之前，先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足，以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風險。 細胞培養(yǎng)基也應先預熱，選擇只預熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱，不但可以節(jié)約實驗時間，而且可以避免因反復加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。 結束操作后，別忘了培養(yǎng)基對光敏感，應盡可能避光保存。 細胞培養(yǎng)的定期檢查 定期檢查培養(yǎng)細胞的形態(tài)，即形狀和外觀，對于細胞培養(yǎng)實驗取得成功至關重要。 除確認細胞的健康狀態(tài)外，每次操作細胞時通過肉眼和顯微鏡檢查細胞還可早期發(fā)現(xiàn)污染征象，避免污染擴散至實驗室其他細胞。 細胞變質(zhì)的征象： 細胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質(zhì)解離以及細胞質(zhì)空泡形成。 這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致，例如： 培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì)，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。 變質(zhì)嚴重時將會成為不可逆的變化。 細胞培養(yǎng)通風櫥的消毒及布局 保持細胞培養(yǎng)通風櫥內(nèi)的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內(nèi)。 向放入通風櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進行消毒。 在通風櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。 培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作 無菌培養(yǎng)瓶、試劑瓶、培養(yǎng)皿等物品使用時方可揭開蓋子，不得將其開放暴露于環(huán)境中，操作完成后盡快蓋上蓋子，取下蓋子時應將蓋子開口朝下放在工作臺面上。 進行無菌操作時不要說話、唱歌或吹口哨。盡快完成實驗，以盡量避免污染。 細胞培養(yǎng)中可能的污染物 細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類： 化學污染物，如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。 生物污染物，如細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。 可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術，降低污染發(fā)生的頻率和嚴重程度。 |
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