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生物前沿研究室新蟲 (小有名氣)
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實驗室干貨｜手把手教你用BCA法精準(zhǔn)測定蛋白濃度！
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想快速掌握BCA蛋白定量技術(shù)？這份超詳細(xì)實操指南別錯過！ 實驗全流程 1?? 96孔板預(yù)處理：先給孔板貼上清晰標(biāo)簽，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入20μL PBS打底，樣品孔則加入18μL PBS，為后續(xù)上樣打好基礎(chǔ)。 2?? 樣品添加：取2μL已稀釋10倍的蛋白樣品，精準(zhǔn)加入樣品孔�？刂坪线m濃度是獲取準(zhǔn)確結(jié)果的關(guān)鍵！ 3?? 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：在首個標(biāo)準(zhǔn)品孔注入20μL 2μg/μL標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，通過梯度稀釋構(gòu)建濃度梯度（最后一孔不加樣）。 4?? 工作液配制：按實際孔數(shù)+5個冗余量，將BCA試劑A液與B液以50:1比例混合，每孔加入200μL，確保加樣量一致。 5?? 氣泡處理：用針頭小心戳破液面氣泡，避免影響反應(yīng)效果和讀數(shù)準(zhǔn)確性。 6?? 恒溫孵育：將96孔板置于37℃孵箱反應(yīng)30分鐘，等待蛋白與BCA試劑充分反應(yīng)顯色。 7?? 結(jié)果檢測：孵育完成后，立即使用酶標(biāo)儀在562nm波長下讀取各孔吸光度，數(shù)值越高代表蛋白濃度越高。 ?? DLab實驗中心特別提醒 ? 試劑使用：標(biāo)準(zhǔn)品可低溫保存，但BCA工作液必須現(xiàn)配現(xiàn)用 ? 數(shù)據(jù)可靠：每個樣品至少設(shè)置3個復(fù)孔，異常值需剔除 ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線：每次實驗都要重新繪制，注意坐標(biāo)軸對應(yīng)關(guān)系 ? 操作規(guī)范：加樣需精準(zhǔn)，避免產(chǎn)生氣泡，加樣后輕晃混勻 ? 及時檢測：孵育結(jié)束后盡快讀數(shù)，防止吸光值發(fā)生變化 ? 濃度控制：提前預(yù)估樣品濃度，確保在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，記錄稀釋倍數(shù) 掌握這些要點，BCA蛋白定量實驗輕松搞定！? #科研干貨 #實驗室技能 #BCA法 #蛋白濃度測定 #科研日常 #實驗操作指南 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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[基金申請]
 成果系統(tǒng)訪問量大，請15分鐘后再嘗試。由此給您造成的不便，敬請諒解。
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xhuama 2026-03-02 | 19/950 |
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