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yyoouuyy新蟲 (初入文壇)
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[交流]
好氧甲烷氧化菌分離篩選 已有2人參與
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最近在做甲烷氧化菌篩選分離,采用NMS培養(yǎng)基富集,在富集液中擴增出了甲烷代謝的基因pmoA,但把富集菌液稀釋涂布到平板(除了加瓊脂,其他組分與液體培養(yǎng)基一樣)上,放在真空干燥器里,充入甲烷倒置培養(yǎng),第二天就長出來很多菌,挑單菌落做不充甲烷,放空氣里的對照,發(fā)現它們也長出來了,但NMS培養(yǎng)基里沒有碳源,不知道它們是怎么長出來的,感覺這個NMS培養(yǎng)基的選擇性好差啊,我看文獻里,好像都是7-14天才長出單菌落,是我等待時間太短嗎?我之前不知道這個培養(yǎng)基的選擇性這么差,調的都是3-4天長出來的單菌落。所以跪求同做甲烷氧化菌篩選的友友們一起探討! 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
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新蟲 (初入文壇)
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新蟲 (初入文壇)
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送紅花一朵 |
其實我也不太懂,但是我可以提一些建議,首先資料上說目的菌種培養(yǎng)時間約倆星期,結果一兩天就長了,毋庸置疑說明是雜菌污染,可能是好氧異養(yǎng)雜菌,培養(yǎng)基中含有微量有機污染物(可能來自瓊脂),甲烷充氣,如果不是純甲烷的話(甲烷空氣混合)就會利用氧氣與微量污染物生長,氮氣填充不生長估計是氮氣很純,氧氣含量幾乎為零,氧氣填充不生長可能是某些有機物在強氧化環(huán)境中被分解,或者是再次培養(yǎng)時有機污染物含量相較于之前的含量少了所以不長,可以試一下更換更純凈的瓊脂凝固劑,排除有機污染物的影響… 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (正式寫手)
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應該是可以的,記得氧氣大約百分之十幾就行,具體的我也不太清楚。雜菌污染問題解決了嗎?如果是那種干燥的蔓延菌落的話可能是芽孢桿菌屬污染了,培養(yǎng)基有有機污染物的話就可能生長,可以換更純凈的瓊脂來培養(yǎng),試試看行不行吧 發(fā)自小木蟲手機客戶端 |
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