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畢合生物2024銅蟲(chóng) (小有名氣)
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細(xì)胞培養(yǎng)中的“小黑點(diǎn)”？別慌，這里有解決辦法！
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做細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候，是不是經(jīng)常遇到培養(yǎng)基里出現(xiàn)“小黑點(diǎn)”的情況？今天就來(lái)給大家嘮嘮這些“小黑點(diǎn)”到底是個(gè)啥，以及怎么處理它們！ 一、“小黑點(diǎn)”是個(gè)啥？ 細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的“小黑點(diǎn)”，可能是以下幾種情況： 細(xì)菌污染如果細(xì)胞被細(xì)菌污染，培養(yǎng)基會(huì)變渾濁、變黃，細(xì)胞狀態(tài)會(huì)明顯變差。在顯微鏡下，黑點(diǎn)會(huì)游動(dòng)或翻滾，這和布朗運(yùn)動(dòng)不一樣。 細(xì)胞殘骸細(xì)胞老化后，可能會(huì)出現(xiàn)破碎的細(xì)胞殘骸，看起來(lái)像是“小黑點(diǎn)”。 血清沉淀血清經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融后，會(huì)產(chǎn)生沉淀，看起來(lái)像是“小黑點(diǎn)”。如果血清經(jīng)過(guò)熱滅活，沉淀物會(huì)更多。 培養(yǎng)基pH值問(wèn)題如果培養(yǎng)基的pH值偏高，細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境不好，也可能出現(xiàn)“小黑點(diǎn)”。 原代細(xì)胞中的雜質(zhì)如果是培養(yǎng)原代細(xì)胞，出現(xiàn)的“小黑點(diǎn)”可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。 二、怎么處理“小黑點(diǎn)”？ 確認(rèn)是否為細(xì)菌污染 觀察培養(yǎng)基是否變渾濁、變黃。 細(xì)胞狀態(tài)是否明顯變差。 顯微鏡下觀察黑點(diǎn)是否游動(dòng)或翻滾。 如果是細(xì)菌污染，建議使用消毒劑處理后直接丟棄；如果細(xì)胞比較珍貴，可以用5-10倍的抗生素沖洗24-48小時(shí)，再換成常規(guī)培養(yǎng)基。 細(xì)胞殘骸 離心300-500rpm，3分鐘，分離完整細(xì)胞和碎片。 掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī)，減少血清凍融次數(shù)。 血清沉淀 盡量減少血清凍融次數(shù)。 如果血清經(jīng)過(guò)熱滅活，沉淀物會(huì)更多，建議不進(jìn)行熱滅活操作。 培養(yǎng)基pH值問(wèn)題 將培養(yǎng)基配制成適宜細(xì)胞生長(zhǎng)的pH值。 原代細(xì)胞中的雜質(zhì) 如果是原代細(xì)胞，多次傳代可以消除雜質(zhì)。 三、總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中的“小黑點(diǎn)”，別慌！ 細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)“小黑點(diǎn)”雖然讓人頭疼，但只要找到原因，就能輕松解決！確認(rèn)是否為細(xì)菌污染，如果是，及時(shí)處理；如果不是，根據(jù)具體情況采取相應(yīng)措施。只要注意這些細(xì)節(jié)，細(xì)胞就能健康生長(zhǎng)！ 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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