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微生物實驗室:菌株保存、復(fù)蘇與銷毀全攻略
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微生物實驗的時候,菌株的保存、復(fù)蘇和銷毀是不是讓你頭大?今天就來給大家嘮嘮這些超重要的實驗操作,讓你輕松搞定! 一、菌株保存:給菌株找個“家” 平板4℃保存法這是最簡單的短期保存方法,適合每周需要轉(zhuǎn)種的質(zhì)控菌株。把菌株轉(zhuǎn)種到平板上,標(biāo)記好日期和菌名,放入2-8℃冰箱,保存周期不超過1個月。 磁珠快速冷凍法適合苛氧菌株(如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等)。刮取菌苔,放入含磁珠的保存管,記錄信息后立即放入-80℃冰箱。這種方法可以保持細(xì)菌1-3年的活性和特性。 甘油肉湯快速冷凍法適用于一般細(xì)菌。將對數(shù)生長期的細(xì)菌刮取放入含10%-15%甘油的高營養(yǎng)肉湯中,記錄信息后放入-80℃冰箱。這種方法也可以保持細(xì)菌1-3年的活性。 干燥冷凍法適用于一般細(xì)菌。用厚的無菌濾紙片從平皿上刮取細(xì)菌苔,放入滅菌管中,先在-20℃冰凍,再移入-80℃冰箱。這種方法同樣可以保持細(xì)菌1-3年的活性。 二、菌株復(fù)蘇:讓菌株“復(fù)活” 干燥冷凍法保存的菌株用無菌鑷子取出濾紙片,放入無菌肉湯管,然后在培養(yǎng)基上劃線接種。操作完后立即將菌株放回原保存位置。 甘油肉湯快速冷凍法保存的菌株用接種環(huán)挑取一環(huán)后直接劃線接種,無需解凍。操作完后立即將菌株放回原保存位置。 磁珠快速冷凍法保存的菌株從-80℃冰箱取出,室溫解凍后,用接種環(huán)挑取一顆磁珠,接種到平板上。 新購置菌株 初次復(fù)蘇時,應(yīng)批量保存在菌種管中,放入-80℃冰箱。 新菌株復(fù)蘇后,傳代最多不超過3次,超過3次將不再作為標(biāo)準(zhǔn)菌株使用。 三、菌株銷毀:安全處理很重要 菌株銷毀時,一定要確保安全!對于有較強抵抗力和強致病性的芽胞菌株(如炭疽桿菌、肉毒梭狀芽胞桿菌等),應(yīng)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。第一次高壓滅菌后,放入35℃孵箱培養(yǎng),使芽胞繁育成繁殖體,再進(jìn)行第二次高壓滅菌,確保徹底滅菌。 四、總結(jié):菌株保存、復(fù)蘇與銷毀,微生物實驗的“三大法寶” 菌株的保存、復(fù)蘇和銷毀雖然聽起來復(fù)雜,但只要按照正確的方法操作,就能輕松搞定!給菌株找個合適的“家”,讓它們安全“復(fù)活”,并安全處理不再需要的菌株,你的微生物實驗就能更順利! 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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