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畢合生物2024銅蟲(chóng) (小有名氣)
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免疫組化實(shí)驗(yàn)“脫片”？這幾個(gè)妙招輕松搞定！
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做免疫組化實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，是不是經(jīng)常遇到切片“脫片”的問(wèn)題？今天就來(lái)給大家嘮嘮幾個(gè)超實(shí)用的小妙招，讓你的實(shí)驗(yàn)不再“掉片”！ 一、脫片問(wèn)題大揭秘：到底為啥會(huì)脫片？ 玻片質(zhì)量不行 買(mǎi)的多聚賴氨酸玻片質(zhì)量差，那可不行！一定要選質(zhì)量好的品牌，不然切片就像在“玻璃渣”上跳舞，容易掉下來(lái)。 切片機(jī)太老 切片機(jī)要是老掉牙了，切出來(lái)的切片厚薄不均，那可太容易脫片了。就像用鈍刀切菜，切出來(lái)的肯定不整齊。 烤片時(shí)間短 烤片時(shí)間不夠，溫度不夠，切片就像沒(méi)烤熟的面包，一碰就掉。一定要烤到位，讓切片牢牢地“粘”在玻片上。 操作太猛 操作的時(shí)候甩得太猛，切片容易被“甩飛”。有脫片嫌疑的片子，最好輕輕甩，或者用衛(wèi)生紙從邊緣慢慢吸水。 修復(fù)時(shí)間過(guò)長(zhǎng) 抗原修復(fù)時(shí)高壓時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或者放進(jìn)修復(fù)液時(shí)手法不好，切片很容易“飛走”。特別是用EDTA修復(fù)，比檸檬酸更容易脫片，一定要小心。 組織有問(wèn)題 如果樣本組織有壞死，那可太容易脫片了。一定要確保樣本組織新鮮，沒(méi)有壞死。 二、解決脫片問(wèn)題的“秘籍” 選好玻片 一定要選質(zhì)量好的多聚賴氨酸玻片，這是基礎(chǔ)中的基礎(chǔ)！就像給切片建一個(gè)“穩(wěn)固的家”。 檢查切片機(jī) 定期檢查切片機(jī)，確保機(jī)器狀態(tài)良好。如果機(jī)器太老，該換就換，別心疼錢(qián)！ 烤片要到位 烤片時(shí)間要足夠，溫度要合適。一般來(lái)說(shuō)，烤片時(shí)間不能少于30分鐘，溫度要達(dá)到60℃左右。這樣切片才能牢牢地“粘”在玻片上。 操作要輕柔 操作的時(shí)候動(dòng)作一定要輕柔，特別是有脫片嫌疑的片子，更要小心。輕輕甩，慢慢吸水，別讓切片“受驚”。 修復(fù)要小心 抗原修復(fù)時(shí)，高壓時(shí)間要控制好，一般不超過(guò)10分鐘。放進(jìn)修復(fù)液時(shí)動(dòng)作要輕，別“咚”的一聲丟進(jìn)去。小心輕放，切片才會(huì)乖乖的。 處理組織 確保樣本組織新鮮，沒(méi)有壞死。如果有壞死組織，一定要剔除干凈。 三、總結(jié)：免疫組化實(shí)驗(yàn)，脫片不再怕！ 免疫組化實(shí)驗(yàn)雖然容易脫片，但只要注意這些細(xì)節(jié)，就能輕松搞定！選好玻片，檢查切片機(jī)，烤片要到位，操作要輕柔，修復(fù)要小心，處理組織要新鮮。這些細(xì)節(jié)做好了，脫片問(wèn)題就能大大減少！ 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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