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生物前沿研究室新蟲 (小有名氣)
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動物行為學 | 曠場實驗
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曠場實驗(Open field test, OFT)又稱敞箱實驗，是一種評價嚙齒類實驗動物自主運動行為、探究行為與緊張度的一種方法，現(xiàn)己經(jīng)廣泛應(yīng)用于帕金森病、抑郁癥、焦慮癥等神經(jīng)、精神疾病以及中樞藥物評篩的研究中，通過曠場實驗觀察實驗動物的焦慮水平，其中，水平活動、中央格停留時間、梳毛次數(shù)反映動物的焦慮情況，垂直活動反映動物對周圍環(huán)境的不確定性和對周圍環(huán)境中可能存在的危險性的觀察。 實驗動物 大鼠或小鼠。 實驗裝置 整套曠場實驗系統(tǒng)由曠場箱體、攝像系統(tǒng)和視頻記錄分析軟件共同構(gòu)成。實驗時將動物放入曠場中的特定位置，用攝像系統(tǒng)來監(jiān)測動物在曠場中的活動情況，通過分析軟件來進行動物的軌跡追蹤和數(shù)據(jù)采集分析。 實驗步驟 1.實驗裝置安裝好后，將動物從飼養(yǎng)籠里取出，背向?qū)嶒炚叻胖玫綍鐖龅闹醒雲(yún)^(qū)域，實驗者迅速離開，任其動物在實驗箱自由活動。 2.迅速開啟軟件的視頻采集或攝像系統(tǒng)的視頻錄制，記錄動物在曠場中5-10min的活動情況；（也可提前開啟軟件采集，再放置動物，軟件分析過程中可設(shè)置扣除前期的準備時間） 3.實驗監(jiān)測時間結(jié)束后將小鼠取出并且放回飼養(yǎng)籠內(nèi)，對曠場反應(yīng)箱底部、放置物以及側(cè)壁進行徹底清潔，以免本次動物余留的信息（如動物的大小便、氣味）影響下次測試結(jié)果，大部分研究采用乙醇進行清潔，乙醇濃度亦各不相同用75%酒精或?qū)嶒炗孟舅謇碚麄�曠場箱體，等待晾干后更換小鼠繼續(xù)重復(fù)以上實驗。在測試下一只動物前須讓乙醇完全揮發(fā)，如應(yīng)用 95% 乙醇，揮發(fā)時間可能需要 5~10 min。 實驗應(yīng)用 曠場實驗既可用于觀察實驗動物的自主運動能力，也可評估動物的焦慮等情緒行為。 1.評估自主運動能力 當曠場實驗用于評估動物的自主運動能力時，主要觀察動物靜止（低于100 cm/s）、緩慢運動（100~300 cm/s）和快速運動（300~500 cm/s）三種運動狀態(tài)所占據(jù)的絕對時間和時間比，通過比較這三種狀態(tài)的時間，得出動物運動能力的差異。此外也可通過比較動物的平均速度、軌跡線和總運動距離等反應(yīng)動物的活動能力。 2.評估動物焦慮 當曠場實驗用于評估動物焦慮行為時，主要記錄動物在曠場中不同區(qū)域所待的時間及尿便次數(shù)、直立次數(shù)等行為。通常來說，小鼠因為趨觸性（thigmotaxis）喜歡緊貼墻壁，即更多的在外圍活動，這在有焦慮樣行為的小鼠中更為明顯：焦慮程度較低的小鼠傾向于在曠場的中央即開放區(qū)域停留更多的時間。此外還有如下三種結(jié)果參數(shù)：直立次數(shù)：又稱垂直得分、站立次數(shù)，指鼠一對前足均騰空或攀附箱壁，站立后雙爪放下為直立一次。直立次數(shù)反映鼠的探索行為及對新環(huán)境的好奇程度。排便次數(shù)：又稱糞便粒數(shù)，反映動物對陌生環(huán)境的緊張和恐懼程度。人們普遍認為排便次數(shù)反映嚙齒類動物的焦慮程度。修飾次數(shù)：又稱理毛次數(shù)，指鼠對面部、四肢、軀干和生殖器的清洗行為。鼠的修飾次數(shù)是對新異環(huán)境產(chǎn)生的應(yīng)激行為，說明此時鼠興奮度較高。 實驗評價 曠場實驗是評價實驗動物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種常用方法。操作簡便，方法可靠。特別是計算機技術(shù)和圖像處理技術(shù)的引入，使動物行為分析的檢測指標大為增加，且具有高效、無創(chuàng)、靈敏、客觀等諸多優(yōu)點。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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