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Longlight鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
如何使DNA跑電泳時(shí)出現(xiàn)好看的條帶
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相信很多實(shí)驗(yàn)人員在做核酸電泳時(shí)碰到過DNA條帶不清晰、有重影、拖尾、變形的現(xiàn)象，這些是什么原因?qū)е碌哪兀?br />
（1）DNA 降解。避免核酸酶污染。 （2）DNA 上樣量過多。減少凝膠中 DNA 上樣量。 （3）電泳緩沖液陳舊: 電泳緩沖液多次使用后，離子強(qiáng)度降低，pH值上升，緩沖能力減弱，從而影響電泳效果。建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。 （4）電泳條件不合適。電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度＜30℃ ,巨大DNA鏈，溫度應(yīng)＜15℃，核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力。 （5）DNA 樣含鹽過高； （6）有蛋白污染。電泳前抽提去除蛋白。 （7）DNA 變性。電泳前勿加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA。 （8）瓊脂糖膠制作時(shí)溶膠不完全以致瓊脂糖顆粒殘留不均勻、有污染或瓊脂糖質(zhì)量不好； （9）核酸染料效果下降或者添加量少； （10）凝膠加樣孔形成有問題或者上樣時(shí)破壞加樣孔； （11）凝膠厚度太厚，超過5mm，也可能會(huì)導(dǎo)致條帶再電泳過程中擴(kuò)散； （12）上樣緩沖液不合適； 選擇達(dá)遠(yuǎn)辰光電泳系列產(chǎn)品，包含核酸預(yù)制膠、DNA Marker、電泳緩沖液、染料，讓你的DNA條帶如想像中的平整、清晰。 |
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