| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 810 | 回復(fù): 0 | |||
畢合生物2024銅蟲 (小有名氣)
|
[交流]
生物學(xué)研究的“超級神器”
|
|
生物學(xué)研究的“超級神器” 做分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有沒有聽說過“雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)”?這可是近年來超火的研究工具,能幫你輕松搞定基因調(diào)控、miRNA功能驗(yàn)證,甚至藥物篩選! 一、雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)是個(gè)啥? 簡單來說,雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)就是一種超厲害的實(shí)驗(yàn)技術(shù),它利用兩種熒光素酶(螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶)來檢測基因表達(dá)和調(diào)控元件的活性。 二、它的原理超簡單! 熒光素酶反應(yīng) 螢火蟲熒光素酶:在ATP、鎂離子等條件下,催化熒光素氧化,發(fā)出黃綠色熒光 海腎熒光素酶:催化腔腸素與氧氣反應(yīng),發(fā)出藍(lán)色熒光 這兩種熒光素酶發(fā)出的光可以通過儀器檢測到,而且它們的發(fā)光強(qiáng)度和基因表達(dá)水平是成正比的哦 報(bào)告基因的應(yīng)用 把感興趣的基因調(diào)控元件(比如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子)和熒光素酶基因拼接在一起,構(gòu)建成報(bào)告基因載體。當(dāng)細(xì)胞里的調(diào)控元件被激活時(shí),熒光素酶基因就會表達(dá),發(fā)出熒光。 三、系統(tǒng)組成:實(shí)驗(yàn)的“裝備庫” Arsenal 檢測試劑 螢火蟲熒光素酶檢測試劑:包含熒光素、ATP、鎂離子等,能檢測到螢火蟲熒光素酶發(fā)出的光。 海腎熒光素酶檢測試劑:含有腔腸素,用于檢測海腎熒光素酶的活性。 這些試劑就像是“熒光探測器”,能精準(zhǔn)地捕捉到熒光素酶發(fā)出的光信號! 報(bào)告基因載體 螢火蟲熒光素酶載體:把目標(biāo)基因的啟動(dòng)子區(qū)域克隆到熒光素酶基因前面,構(gòu)建成重組載體。 海腎熒光素酶載體:通常含有穩(wěn)定的啟動(dòng)子(如SV40),用于校正實(shí)驗(yàn)誤差。 這兩種載體就像是“熒光探針”,幫助我們精準(zhǔn)地檢測基因調(diào)控的變化! 四、主要應(yīng)用:實(shí)驗(yàn)界的“多面手” 基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究 想知道某個(gè)基因的啟動(dòng)子是否被激活?把啟動(dòng)子區(qū)域克隆到熒光素酶基因前面,轉(zhuǎn)染細(xì)胞后檢測熒光強(qiáng)度,就能知道啟動(dòng)子的活性啦! miRNA功能研究 miRNA是不是真的能調(diào)控某個(gè)基因?把基因的3'UTR區(qū)域克隆到熒光素酶基因后面,如果miRNA能結(jié)合,熒光就會減弱,這就證明miRNA起作用啦! 藥物研發(fā) 想篩選能調(diào)控基因表達(dá)的藥物?用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng),加入藥物后觀察熒光變化,就能快速找到目標(biāo)藥物,簡直不要太方便! 五、實(shí)驗(yàn)流程:輕松上手的“操作指南” 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 把構(gòu)建好的螢火蟲熒光素酶載體和海腎熒光素酶載體共轉(zhuǎn)染到細(xì)胞里 培養(yǎng)與誘導(dǎo) 轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞在合適條件下培養(yǎng),讓熒光素酶基因表達(dá) 熒光檢測 先加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑,檢測黃綠色熒光;再加入海腎熒光素酶檢測試劑,檢測藍(lán)色熒光。 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
| 1 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 中國林科院林化所(南京)2026年招收化學(xué)/材料/環(huán)境工程等背景碩士研究生3名 +3 | realstar2006 2026-02-27 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +9 | ErMiao1020 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
[碩博家園] 2025屆雙非化工碩士畢業(yè),申博 +4 | 更多的是 2026-02-27 | 5/250 |
|
|
[考研] 成績276,專業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +7 | 小陳朵 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +6 | 天下熯 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
[考研] 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)材料與化工281求調(diào)劑,有科研和獲獎(jiǎng)經(jīng)歷 +6 | wsxw 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 材料類考研調(diào)劑 +6 | gemmgemm 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
[考研]
材料325求調(diào)劑
30+3
|
mariusuki 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +6 | wyyyqx 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
[考研] 考研復(fù)試調(diào)劑,過國家線的同學(xué)都可報(bào)名 +7 | 黑!在干嘛 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +4 | 2103240126 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
[考研] 0856材料調(diào)劑 +5 | 沿岸有貝殼OUC 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +9 | 材紫有化 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料復(fù)試調(diào)劑 +5 | 學(xué)材料的點(diǎn) 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
[考研] 0856化工專碩求調(diào)劑 +15 | 董boxing 2026-03-01 | 15/750 |
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +7 | yhk_819 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +8 | 19171856320 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +3 | dua1 2026-03-01 | 4/200 |
|
|
[考研] 295復(fù)試調(diào)劑 +3 | 簡木ChuFront 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | 南迦720 2026-02-28 | 10/500 |
|