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Abbkine亞科因新蟲 (初入文壇)
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螢火蟲熒光素酶檢測試劑盒常用樣本類型
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螢火蟲熒光素酶檢測試劑盒的常用樣本類型主要有以下幾種: 細胞樣本 貼壁細胞:如 HeLa 細胞、HEK-293T 細胞等13。在實驗中,通常需要先將細胞培養(yǎng)在合適的培養(yǎng)容器中,如培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)板等。檢測時,需吸去細胞培養(yǎng)基,用 PBS 等緩沖液緩慢輕柔地洗滌細胞,以去除殘留的培養(yǎng)基,然后加入適量的細胞裂解液進行裂解,使細胞內(nèi)的熒光素酶釋放出來,用于后續(xù)檢測。 懸浮細胞:例如白血病細胞系 K562 等。對于懸浮細胞,一般是先通過離心收集細胞,棄去上清液,再用 PBS 等洗滌細胞,離心后加入細胞裂解液進行裂解,進而獲取含有熒光素酶的細胞裂解物用于檢測3。 組織樣本 動物組織:包括小鼠、大鼠等動物的各種組織,如肝臟、腎臟、腦組織等。首先需要將組織從動物體內(nèi)取出,用生理鹽水等清洗干凈,去除血液等雜質(zhì)。然后將組織剪切成小塊,使用組織勻漿器等工具在合適的裂解緩沖液中進行勻漿處理,使組織細胞破碎,釋放出熒光素酶。勻漿液經(jīng)過離心等處理后,取上清液即可用于螢火蟲熒光素酶的檢測。 植物組織:像葉片、根、莖等植物組織也可作為樣本。將采集的植物組織洗凈、晾干后,稱取一定量的組織,在液氮中研磨成粉末狀,再加入細胞裂解液進行充分裂解,經(jīng)過離心等步驟獲取上清液,用于檢測其中的熒光素酶活性。 細胞或組織的裂解物保存樣本 如果不能及時進行檢測,可以將細胞或組織裂解后,將裂解物保存在合適的條件下,如 - 20℃或 - 80℃冰箱,待需要時取出解凍進行檢測234。但要注意避免反復(fù)凍融,以免影響熒光素酶的活性。 |
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