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Bio Waste新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
鎳柱蛋白純化求助
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我是用BL21表達(dá)了植物中的一個(gè)蛋白，過(guò)完鎳柱后有一些雜蛋白，目前有個(gè)問(wèn)題是我過(guò)夜孵育后用10、20mM咪唑去洗，很容易把目的蛋白洗下來(lái)，導(dǎo)致后面洗脫的時(shí)候目的蛋白幾乎沒(méi)有了，想請(qǐng)教一下各位大佬，有什么方法可以避免目的蛋白被大量洗滌下來(lái)。 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶(hù)端 |
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3樓2025-01-04 22:48:52
哥本哈根達(dá)斯
金蟲(chóng) (知名作家)
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- 專(zhuān)業(yè): 生物化學(xué)
前面的咪唑濃度可以再低一點(diǎn)，可以拉線(xiàn)性梯度確定那個(gè)濃度不會(huì)洗脫下來(lái)，哪個(gè)會(huì)把你的目標(biāo)蛋白一下來(lái)，梯度區(qū)間小才能更純，另外考慮變換不同的pH和離子強(qiáng)度，不要只考慮單因素 發(fā)自小木蟲(chóng)手機(jī)客戶(hù)端 |
2樓2024-12-11 15:46:26
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