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無難事新蟲 (初入文壇)
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[求助]
質(zhì)粒共轉(zhuǎn)化求助 已有1人參與
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| 大家好，我使用pET-28a與pET-22b兩個(gè)質(zhì)粒分別攜帶一個(gè)目的基因，然后共轉(zhuǎn)化進(jìn)BL21，雙抗進(jìn)行篩選。然后一個(gè)菌落的菌p我做了兩管，1管是pET-28a通用引物+28a質(zhì)粒上目的基因下游引物，另外1管是pET-22b通用引物+22b質(zhì)粒上目的基因下游引物。都能p出來，但是誘導(dǎo)的時(shí)候發(fā)現(xiàn)只有一種蛋白表達(dá)，是什么原因呢？ |
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不是基因成功連接上表達(dá)載體鑒定完畢后都能表達(dá)的，基因表達(dá)是較復(fù)雜的過程，增大誘導(dǎo)劑量及誘導(dǎo)時(shí)間或者更換培養(yǎng)基試試~ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2024-11-01 11:44:51
無難事
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3樓2024-11-01 13:56:08
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我們之前是把構(gòu)建好的不同的表達(dá)載體分別轉(zhuǎn)化到表達(dá)菌中，沒有試過不同的表達(dá)載體共同轉(zhuǎn)化到同一種表達(dá)菌株中的情況，你可以做對(duì)比實(shí)驗(yàn)看看； 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2024-11-01 20:44:29
pennchem
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5樓2024-11-03 13:34:59
yandz680717
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6樓2024-11-04 06:22:25
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7樓2024-11-04 16:43:20
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8樓2024-11-04 20:14:50
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