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承接實(shí)驗(yàn)外包鐵蟲 (初入文壇)
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胃癌動(dòng)物模型及常用細(xì)胞株
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胃癌（gastric carcinoma）是指原發(fā)于胃的上皮源性惡性腫瘤。根據(jù)2020年中國(guó)最新數(shù)據(jù)，胃癌發(fā)病率和死亡率在各種惡性腫瘤中均位居第三。全球每年新發(fā)胃癌病例約120萬(wàn)，中國(guó)約占其中的40%。胃癌的發(fā)生由多種因素共同造成，其中最常見的病因包括幽門螺桿菌（Hp）感染，癌前病變、遺傳因素、環(huán)境和飲食因素等。胃癌的病理類型主要是腺癌，也有鱗狀細(xì)胞癌、腺鱗癌、類癌、小細(xì)胞癌等。按組織結(jié)構(gòu)不同，腺癌還可分為乳頭狀癌、管狀腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌和印戒細(xì)胞癌。 我國(guó)早期胃癌占比很低，僅約20%，大多數(shù)發(fā)現(xiàn)時(shí)已是進(jìn)展期，總體5年生存率不足50%。近年來(lái)隨著胃鏡檢查的普及，早期胃癌比例逐年增高。手術(shù)治療是胃癌最重要的治療方法，早期胃癌術(shù)后5年生存率可達(dá)90.9%-100%，然后晚期胃癌5年生產(chǎn)率仍不足30%。進(jìn)展期患者需要根據(jù)胃癌病理學(xué)類型及臨床分期，采用以手術(shù)治療為主，聯(lián)合圍手術(shù)期化療（氟尿嘧啶、奧沙利鉑、紫杉醇等）、生物靶向治療（曲妥珠單抗、雷莫蘆單抗、阿帕替尼、派姆單抗等）、放療等手段綜合治療。 圖片 胃癌常用的動(dòng)物模型 圖片 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物包括非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物、犬、兔子及大鼠、小鼠、裸鼠等�？紤]到成本、誘發(fā)率、飼養(yǎng)等原因，大鼠、小鼠和裸鼠較為常用。 1、基因工程小鼠模型 INS‐GAS小鼠是一種胃泌素過(guò)度表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠，在無(wú)外界刺激的情況下，自發(fā)形成胃癌。當(dāng)INS‐GAS小鼠感染幽門螺桿菌時(shí)，可加速胃癌的發(fā)生。這種受Hp感染的INS‐GAS小鼠建立的胃癌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，主要用來(lái)檢查與胃癌發(fā)生相關(guān)的各種基因表達(dá)、促進(jìn)劑或拮抗劑、腫瘤細(xì)胞的凋亡因素等。 Wnt1轉(zhuǎn)基因小鼠、K-Ras和COX-2轉(zhuǎn)基因小鼠。最常見的K-Ras轉(zhuǎn)基因小鼠是利用K19啟動(dòng)子過(guò)表達(dá)致癌基因K-Ras（G12D），38％的這些小鼠在16個(gè)月齡時(shí)表現(xiàn)出胃黏膜腸上皮化生和胃腺癌的形成。K-Ras（G12D）小鼠出現(xiàn)了早期趨化因子（如CXCL1）上調(diào)以及炎性細(xì)胞和成纖維細(xì)胞聚集的現(xiàn)象，這些都與胃癌的發(fā)生相關(guān)。這種基因工程小鼠可以用來(lái)檢查與胃癌有關(guān)的各種基因表達(dá)、基因治療、腫瘤細(xì)胞相關(guān)凋亡因素等，但基因工程小鼠價(jià)格昂貴，且多為單個(gè)基因的改變。 2、誘導(dǎo)模型 化學(xué)誘癌劑包括：甲基硝基亞硝基胍（MNNG）、甲基亞硝基脲（MNU）、乙基硝基亞硝基胍（ENNG） 等。 不同劑量MNNG所誘導(dǎo)的Wistar大鼠中胃癌發(fā)病率的不同，且男性發(fā)病率要遠(yuǎn)高于女性，化學(xué)誘癌劑的誘癌方法相對(duì)簡(jiǎn)便、誘癌率高，誘導(dǎo)的胃癌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型與人胃癌的自然發(fā)生機(jī)制比較相似，但該法誘導(dǎo)周期長(zhǎng)，不適宜用于短期實(shí)驗(yàn)，且不適合用于批量實(shí)驗(yàn)。 也可以利用幽門螺桿菌(Hp)來(lái)誘導(dǎo)大鼠高分化腺癌，不過(guò)單用Hp誘導(dǎo)胃癌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，不僅誘導(dǎo)成瘤率低，而且周期會(huì)相對(duì)更長(zhǎng)，目前已很少用，多被Hp聯(lián)合化學(xué)誘癌劑替代。 化學(xué)誘癌劑聯(lián)合Hp構(gòu)建的胃癌實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型不僅可以近似的模擬人體胃癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程，而且可以在發(fā)展過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的整體和局部作出評(píng)估，對(duì)于研究胃癌的病因?qū)W與生物學(xué)行為有著重要意義，但其誘導(dǎo)周期相對(duì)較長(zhǎng)，不適宜用于批量實(shí)驗(yàn)研究。 3、種植模型 1、異位種植 胃癌異位種植模型是將胃癌細(xì)胞種植在胃以外的部位，其中將腫瘤細(xì)胞接種于皮下由于具有操作簡(jiǎn)單、腫瘤表淺、便于觀察、潛伏期短等特點(diǎn)，是目前最常見的接種部位。 異位接種模型造模操作簡(jiǎn)單，成瘤率高，周期短，實(shí)驗(yàn)人員常用該種模型研究各種抗腫瘤藥物的干預(yù)效果、各種免疫細(xì)胞免疫效應(yīng)、分子靶向藥物的療效等方面。但異位模型不能真實(shí)的反映腫瘤細(xì)胞所處的微環(huán)境對(duì)腫瘤的影響，其生物學(xué)行為與人胃癌不相符。 2、原位種植 相比于異位種植模型，原位種植模型更接近能夠真實(shí)模擬胃癌細(xì)胞在人體內(nèi)的侵襲、轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為和特征；與化學(xué)誘變劑和Hp誘導(dǎo)模型相比，種植模型的誘導(dǎo)周期更短，更有利于研究。目前多用種植模型來(lái)研究胃癌生物學(xué)行為、對(duì)新型抗腫瘤藥物進(jìn)行篩選、評(píng)價(jià)分子靶向藥物的療效等。 原位種植模型按照腫瘤細(xì)胞組織形態(tài)的不同，可分為細(xì)胞懸液模型和組織塊模型。 ①細(xì)胞懸液模型：目前常用于胃癌種植的細(xì)胞懸液有SGC-7901（人胃低分化腺癌細(xì)胞系）、MGC803（低分化粘液腺癌）、MKN45（胃低分化腺癌）、AZ521（人胃癌細(xì)胞系）、VX2（兔鱗狀細(xì)胞乳頭狀癌）等。 ②組織塊種植模型：組織塊種植模型是目前的主流建模方法，將胃癌細(xì)胞懸液種植于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的皮下，待其成瘤達(dá)一定體積時(shí)，將組織塊移植到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胃中或者將手術(shù)切除的人胃癌組織塊直接接種于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的胃中建立模型。 圖片 MDL常用的部分胃癌細(xì)胞株 圖片 MKN45：來(lái)源于62歲的亞洲女性患者中分離出的低分化腺癌細(xì)胞，MKN-45的癌胚抗原(CEA) 的產(chǎn)生高于正常水平。 HGC-27：來(lái)源胃癌患者的轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)灶，未分化，能分泌粘液素，該細(xì)胞株除腺苷三磷酸酶、乳酸脫氫酶和亮氨酸氨肽酶外，酶活性普遍很低。 MGC803：來(lái)源于53歲男性原發(fā)性胃低分化粘液樣腺癌患者建立的，STR檢測(cè)位點(diǎn)同HELA，但顯示出一些特定的差異，表明可能存在雜交細(xì)胞系。 SGC-7901：來(lái)源于一位56歲女性胃腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶。研究檢測(cè)發(fā)現(xiàn)STR于HELA多株細(xì)胞為同一遺傳背景，懷疑彼此間存在交叉污染，也可能為HELA細(xì)胞的衍生物。 AGS：來(lái)源于人胃腺癌細(xì)胞，經(jīng)皮下成瘤檢測(cè)實(shí)驗(yàn)表明該細(xì)胞系在皮下接種后，能正常成瘤。 MKN74：來(lái)源于一名37歲胃中分化管狀腺癌男性患者肝轉(zhuǎn)移病灶的細(xì)胞，細(xì)胞EBV、HBV、HIV-1、HIV-2陰性。MKN74細(xì)胞曾經(jīng)感染支原體并通過(guò)MC-210消除支原體。 MKN45：來(lái)源于一位62歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。 SNU-1：來(lái)源于一位44歲的韓國(guó)男性經(jīng)細(xì)胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立的細(xì)胞株。SNU-1細(xì)胞L-多巴脫羧酶 (DDC)表達(dá)陰性、VIP受體表達(dá)陽(yáng)性，但胃受體缺失。沒有注意到SNU-1細(xì)胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受體基因的擴(kuò)增或重排的證據(jù)。 |
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