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| 【懸賞金幣】回答本帖問(wèn)題，作者zhangwei1982將贈(zèng)送您 50 個(gè)金幣 | ||
zhangwei1982捐助貴賓 (初入文壇)
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[求助]
抗原聚集并且裂解，怎么破？
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各位，情況是這樣的： 我設(shè)計(jì)了一個(gè)重組抗原，分子量大約59KD左右，pET-32a(+)， BL21表達(dá)菌，Amp抗性，His標(biāo)簽。 抗原剛純化出來(lái)，電泳只有一條帶就在59KD附近。 但是，4℃放置3-4周，出現(xiàn)2個(gè)問(wèn)題：1、有明顯的絮狀物漂在溶液里面，還比較多；2、跑電泳，目的條帶幾乎看不見(jiàn)了，存在多條雜帶，分別在52KD、30KD、27KD、22KD、20KD處。第1個(gè)問(wèn)題，可能是保存液的問(wèn)題，我目前還在優(yōu)化；第2個(gè)問(wèn)題，應(yīng)該是抗原裂解了，但是為什么呢？想不通。當(dāng)然，也有可能第1個(gè)問(wèn)題與第2個(gè)問(wèn)題相關(guān)。 所以，想請(qǐng)教各位，以前有沒(méi)有碰到類(lèi)似的現(xiàn)象，出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題的原因可能有哪些。 望大家給點(diǎn)意見(jiàn)，不勝感激。 |
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