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承接實(shí)驗(yàn)外包鐵蟲 (初入文壇)
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[交流]
循環(huán)系統(tǒng)模型
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心肌梗死模型(成模率>90%) 自發(fā)性高血壓(SHR)模型 心肌缺血再灌注模型(成模率>90%) 高血壓模型(2K1C) 全腦缺血模型 誘發(fā)性高血壓模型(Ang l、L-NAME、DOCA) 腦缺血再灌注模型(成模率>90%) 妊娠高血壓綜合征模型 快速性心律失常模型(強(qiáng)心苷類、電刺激) 絕經(jīng)期高血壓模型 緩慢性心律失常模型(維拉帕米、普蔡洛爾、電刺激) 慢性心力衰竭模型(TAC) 動脈粥樣硬化模型(高脂飼料) 心臟驟停模型 心肌肥厚模型 心肌炎模型 血栓模型 慢性肺動脈高壓模型 案例分析 01 腦缺血動物模型 1、試驗(yàn)動物:SD大鼠 2、試驗(yàn)方法:阻斷大鼠大腦中動脈引起腦局部缺血法 3、試驗(yàn)步驟: (1)腹腔麻醉大鼠,沿頸部正中開口,鈍性分離皮下組織,暴露出左側(cè)頸總動脈,游離出頸總動脈1.5cm,穿線備用。 (2)向遠(yuǎn)心端找到頸外側(cè)動脈,結(jié)扎,提起頸總備用線,在近心端,遠(yuǎn)心端用動脈夾夾住。 (3)在近心端動脈夾處,用注射器針頭刺破血管,拿起位置距動脈夾1mm處,一手稍微提起動脈夾,一手用鑷子夾住線栓。 (4)從小口插入動脈后,去掉遠(yuǎn)心端動脈夾,然后用鑷子夾住線栓,線栓插入到頸內(nèi)距分叉處1.8-2.0cm,用備用線將頸總和線栓一起結(jié)扎住,最好是結(jié)扎雙道。 (5)記錄線栓插入時間,在將動脈夾另一邊近心端頸總結(jié)扎住,去掉動脈夾。 (6)逐層縫合,縫合完畢后用碘伏消毒。 (7)在MCAO造模缺血2h再灌注后的第0h和12h尾靜脈注射待研究藥物。 4、結(jié)果評定: (1)神經(jīng)癥狀,在MCAO后不同時間(小時及天數(shù))觀察動物的行為,按不同方案進(jìn)行評分。較常用的評分為:0無異常;0.5豎毛,輕度運(yùn)動低下;1.0前肢屈曲,運(yùn)動障礙;2.0行動不協(xié)調(diào),屈曲姿勢,旋轉(zhuǎn)運(yùn)動;3.0偏癱,不能站立和行走;4.0痙攣,昏睡;5.0死亡。 (2)用自動或被動防衛(wèi)條件反射觀察MCAO后不同天數(shù)的神經(jīng)功能。 (3)MCAO 24h后再麻酔,取腦放在冰冷鹽水中,30min后作冠狀切片5片,TTC染色,求出腦梗死面積或體積。 (4)腦切片,石蠟包埋,染色,光學(xué)顯微鏡下觀察神經(jīng)細(xì)胞的病理改變,還可用盲法定量測定存活神經(jīng)細(xì)胞數(shù)。 (5)可取缺血區(qū)腦組織測定自由基、神經(jīng)營養(yǎng)因子等指標(biāo)。 5、試驗(yàn)結(jié)果: 圖片 1:假手術(shù)組 2:模型組 3:低劑量組 4:高劑量組 02 心肌缺血再灌注模型 1、試驗(yàn)動物:c57小鼠 2、試驗(yàn)方法:結(jié)扎冠狀動脈再恢復(fù)灌注引起心肌局部缺血法 3、試驗(yàn)步驟: (1)腹腔麻醉小鼠,胸骨左側(cè)剃毛。 (2)胸骨左側(cè)縱向剪開皮膚0.5厘米,鈍性分離皮下肌肉,在分離三和四肋間暴露出胸膜。 (3)用鑷子撕開胸膜進(jìn)入胸腔,用止血鉗撐開肋骨,暴露出心臟。 (4)用鑷子輕輕撕破心膜,用止血鉗輕輕把心臟夾出 (操作過程中不要碰到肺)。 (5)用6-0縫合線結(jié)扎,(結(jié)扎位置與左心耳尖平行處) 輕輕將心臟放回胸腔。在結(jié)扎時加入特制線栓,缺血相應(yīng)時間后拔去線栓,制成心肌缺血再灌注模型。 (6)觀察心臟里面有無出血,無出血后逐層縫合,縫合結(jié)束后擦拭碘伏消毒,然后拔出呼吸機(jī),將小鼠放回籠內(nèi)。 (7)缺血1小時后拔去線栓,制成心肌缺血再灌注模型。 4、結(jié)果評定: (1)心電圖:結(jié)扎后心電圖顯示ST段明顯提高。 (2)TTC染色計(jì)算心肌梗死范圍。 (3)組織形態(tài)學(xué)檢查。 5、試驗(yàn)結(jié)果: 圖片 正常心臟TTC染色 模型組心臟TTC染色, 梗死面積明顯增大 |
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