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huangyan.88.新蟲 (小有名氣)
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[交流]
博萊霉素致大鼠間質(zhì)性肺病模型的構(gòu)建
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肺間質(zhì)纖維化(pumlonary interstitial fibrosis)是一種慢性炎癥間質(zhì)性肺病,以肺泡巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在末端肺泡聚集,實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷、肺泡纖維化為特征。其病因及發(fā)病機(jī)理尚不清楚,5年生存率不超過50%,目前尚無特效的治療方法。因此進(jìn)一步研究其發(fā)病機(jī)制、尋找有效的治療方法,已成為許多國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 Wistar大鼠,雄性,6-8周齡,體重(200±20)g 2、造模方法 雄性Wistar大鼠用10%水合氯醛,4ml/Kg體質(zhì)量腹腔內(nèi)注射。待大鼠麻醉后,將其仰臥位固定在鼠板上,頭低位暴露聲門,水平插入16號靜脈套管針,到達(dá)咽喉部時(shí),壓低針尾,插入氣管,拔出針芯。大鼠經(jīng)氣管內(nèi)一次性灌注博萊霉素藥液5mg/kg。注入后立即將大鼠直立旋轉(zhuǎn),以便于液體均勻在肺內(nèi)散布,制成間質(zhì)性肺病模型。動(dòng)物清醒后隨意進(jìn)食,觀察28天。 3、觀察指標(biāo)及檢測方法 1、大鼠一般情況觀察 每天觀察大鼠的活動(dòng)度、對外界反應(yīng)的靈敏度、大鼠的皮毛光澤、口唇鼻顏色、體重、飲食、呼吸、死傷等情況。 2、病理學(xué)觀察 大鼠用10%水合氯醛溶液(4ml/kg)進(jìn)行麻醉后,取新鮮右肺下葉組織200g,用PBS緩沖液對肺組織周圍的血液等污物進(jìn)行沖洗,經(jīng)10%中性福爾馬林48小時(shí)充分固定后,再通過梯度酒精進(jìn)行脫水,再通過二甲苯進(jìn)行透明,石蠟包埋,間斷4μm切片4張,常規(guī)HE染色,光鏡下觀察肺組織。 |
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