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huangyan.88.新蟲 (小有名氣)
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[交流]
銀環(huán)蛇咬傷致肌無力SD大鼠模型
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世界上現(xiàn)存蛇類大約有3000余種,其中毒蛇超過600種,致命性毒蛇近200種,分為18個(gè)科、大約450多個(gè)屬。蛇類主要分布于北緯67°到南緯40°的區(qū)域內(nèi),其中種類和數(shù)量最多的分布在亞熱帶和熱帶地區(qū)。據(jù)報(bào)道,我國每年毒蛇咬傷事件可達(dá)10萬人次,因蛇咬傷致殘而喪失勞動(dòng)能力者占25%~30%,各類蛇咬傷死亡率達(dá)5%~10%,嚴(yán)重威脅著人們的生命健康。今天我們一起梳理銀環(huán)蛇咬傷模型。 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 KM小鼠和SD大鼠。 實(shí)驗(yàn)方案 1、銀環(huán)蛇毒的KM小鼠半數(shù)致死量(LD50)為0.09mg /kg,測定本實(shí)驗(yàn)銀環(huán)蛇干毒KM小鼠LD50,根據(jù)公式換算為銀環(huán)蛇毒的SD大鼠LD50 ; 按銀環(huán)蛇毒的SD大鼠的LD50倍數(shù),予SD大鼠皮下注射,建立銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型,確定模擬臨床的最佳銀環(huán)蛇干毒劑量。 按Lennon等的分級(jí)法將肌無力癥狀分為4級(jí): 0級(jí),沒有肯定肌無力表現(xiàn); 1級(jí),嘶咬無力,四肢力量較差,在光滑地面上前肢打滑,活動(dòng)減少; 2級(jí),明顯無力,休息時(shí)脊背呈隆起姿勢(shì),頭尾下垂、前肢彎曲,動(dòng)作不協(xié)調(diào); 3級(jí),嚴(yán)重?zé)o力表現(xiàn),無嘶咬動(dòng)作,肌肉震顫,呼吸困難,瀕死或死亡。 2、用低頻重復(fù)神經(jīng)電刺激檢測銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型的腓腸肌電改變; 解剖模型大鼠,觀察膈肌及腓腸肌病理改變。 銀環(huán)蛇毒的KM小鼠LD50的測定 三、建立銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力的中毒動(dòng)物模型 確定銀環(huán)蛇毒致SD大鼠肌無力模型的劑量 (1)銀環(huán)蛇毒最佳劑量是3倍SD大鼠LD50,為0.24mg /kg給 SD大鼠皮下注射已配置的銀環(huán)蛇毒溶液(濃度10μg /mL)。 SD大鼠于1.5h左右出現(xiàn)呼吸困難,2h左右出現(xiàn)張口呼吸,模擬臨床1~4h出現(xiàn)呼吸衰竭,用于早期救治銀環(huán)蛇干毒相關(guān)性早期肌無力的基礎(chǔ)研究。 (2)進(jìn)行RNS檢查,SD 大鼠為給予0.24mg/kg銀環(huán)蛇毒注射的 SD大鼠,行RNS檢查,中毒后,可見肌電遞減改變。 (3)病理結(jié)果 高倍鏡(×200)下模型組膈肌及腓腸肌細(xì)胞腫脹、核排列紊亂。對(duì)照組的膈肌與腓腸肌細(xì)胞形態(tài)未見異常。 |
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