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YX科研小助理新蟲 (小有名氣)
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[交流]
食道癌模型的構(gòu)建
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食道癌（esophageal carcinoma，EC）是一種常見的消化道惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅人類健康。根據(jù)2018年全球癌癥統(tǒng)計(jì)顯示，食道癌的發(fā)病率和死亡率分別在癌癥相關(guān)數(shù)據(jù)排在第7位和第6位。食道癌被認(rèn)為是“沉默”癌癥，早期癥狀不明顯，超過一半的病人確診時(shí)已是晚期且出現(xiàn)可見的轉(zhuǎn)移灶。中晚期的食道癌患者5年生存率低于15％，即便手術(shù)切除腫瘤也無法根治，術(shù)后5年生存率僅有15％-24％，因此目前食道癌仍是無法治愈。 動(dòng)物模型不僅有助于理解食管癌的分子發(fā)病機(jī)制，而且還有助于為疾病制定治療干預(yù)措施。常用動(dòng)物模型為誘發(fā)性食管癌動(dòng)物模型。 動(dòng)物的選擇 主要包括大鼠、小鼠。 造模方法 一、包括亞硝胺致癌模型、4-NQO誘導(dǎo) 致癌模型 1 亞硝胺致癌模型 造模方法：亞硝胺化合物是實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物中最有效的致癌誘變劑，最常用的是甲基芐基亞硝胺(NMBA)和對甲基戊基亞硝胺(MNAN/AMN)。如將NMBA溶于生理鹽水中，配制成0.15%NMBA溶液，按照3.5mg/kg皮下注射，每周2次，連續(xù)10周，建立模型。 優(yōu)缺點(diǎn)：潛伏期短，重現(xiàn)性高，與人類癌癥發(fā)生過程相似。但是成本高，需使用高劑量致癌劑誘導(dǎo)致癌，致癌劑具有毒性。 注意：主要誘發(fā)大鼠食管癌模型，很少用于小鼠。 2 4-NQO誘導(dǎo)致癌模型 造模方法：4-NQO(4-硝基喹琳-1-氧化物)是一種水溶性的喹啉衍生物，將4-NQO配制成100μg/ml的溶液，作為小鼠的飲用水讓小鼠自由飲用，至16周改為去離子水，22周成功建模。 優(yōu)缺點(diǎn)：致癌率高，與人類癌癥發(fā)生過程相似。但是周期長，主要誘導(dǎo)鱗狀細(xì)胞癌。 注意：主要誘發(fā)小鼠口腔、食管癌模型 二、PDX模型 造模方法：將人食管癌細(xì)胞系或食管癌組織塊直接移植到免疫缺陷小鼠皮下，建立模型，常用的人食管癌細(xì)胞株有EC109、KYSE510、KYSE150、KYSE30、TE-1、TE-5、Case17等，常用的免疫缺陷鼠為裸鼠、SCID鼠、NOD/SCID小鼠和NSG小鼠。 優(yōu)缺點(diǎn)：移植性動(dòng)物模型可以模擬人體內(nèi)腫瘤微環(huán)境研究食管鱗癌在體內(nèi)的發(fā)生發(fā)展過程，多用于研究食管鱗癌生長、轉(zhuǎn)移等機(jī)制。針對早期研究多采用異位移植模型，具有制備成功率高、成瘤快等優(yōu)勢，但較少發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移，限制了進(jìn)一步的研究應(yīng)用。且成瘤周期也是限制移植動(dòng)物模型發(fā)展的一個(gè)重要因素，移植型動(dòng)物模型仍是目前應(yīng)用最為廣泛的食管鱗癌動(dòng)物模型。 三、轉(zhuǎn)基因食管癌模型 利用基因工程技術(shù)，如CRISPR/Cas9技術(shù)，將基因轉(zhuǎn)入或敲除，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因食管癌動(dòng)物模型，常用的食管癌基因工程小鼠主要有：Cyclin D1轉(zhuǎn)基因鼠、p53基因工程鼠、P120-連環(huán)蛋白缺陷小鼠、p53和Brcal基因聯(lián)合敲除、p53基因敲除聯(lián)合Cyclin D1過表達(dá)。 總結(jié) 動(dòng)物模型在腫瘤研究中起著重要作用，與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)相比，能更好地了解各種分子機(jī)制之間的轉(zhuǎn)移和腫瘤宿主之間的相互作用，闡明各種相關(guān)疾病的病理生理學(xué)，并間接促進(jìn)新型抗腫瘤干預(yù)措施的開發(fā)。盡管實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類基因組、基因調(diào)控、細(xì)胞類型、器官結(jié)構(gòu)與組成、疾病類型等方面是有一定差別的，但如何提升動(dòng)物模型與人類疾病的相似性是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)根本追求之一。 |
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