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動物實驗該分幾組？如何分組？你都做對了嗎？ 已有1人參與
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在探索新的醫(yī)療方法時，研究者們總會以實驗室中的臨床前研究作為開端。在實驗室中，通過動物進行的實驗至關重要，研究者們通過動物實驗了解藥物安全性和有效性的基本信息，它的結果也直接決定著試驗藥物是否可以進入臨床試驗階段。 進行動物實驗，常常需要把選擇的動物按需要分成若干組。實驗動物分組是實驗設計中的一個非常重要環(huán)節(jié)，美國動物委員會要求投稿時，需要對動物基本信息包括動物來源、品系、生活環(huán)境、分組方法等作出說明。然而大多數(shù)發(fā)表的文章，都未描述實驗動物隨機分組方法，而被編輯索要原始數(shù)據(jù)來證明數(shù)據(jù)的可靠性�？梢姡纸M十分重要。 對于實驗技術，我們可以在具體操作中慢慢練，但是動物分組如果最開始錯了，直接就影響到最后結果的可信性，并且一旦實驗研究開始，后期很難彌補，所以我們在實驗開始前一定要認真考慮這個問題。 實驗動物分組時，我們常常碰到以下情況：該分幾個組合適呢？每只動物腫瘤體積大小各異，又或者是性別和體重均不一，該如何分到各個組里面去呢？今天咱們就來聊一聊如何給動物分組。 分幾組？ 研究目的是動物分組的前提，其中對照組的設計尤其地重要。 為了保證能得到科學有效的數(shù)據(jù)，實驗動物分組時應特別注意建立對照組。對照組可分自身對照組和平行對照組。 1．自身對照組：用每個動物實驗處理前和實驗處理后的各項相關數(shù)據(jù)進行對照，就分別是對照組和實驗組的實驗結果。用每個實驗動物自身對比，可排除個體間的差異。 2．平行對照組：分正對照組和負對照組（空白對照組）兩種。 正對照組是實施與實驗組動物相同但排除了所要觀察的目的因子（如治療手段或藥物）的處理，負對照組則不作任何處理。 例如，要觀察某種藥物的藥效，對實驗組動物采用肌肉注射的給藥方法； 正對照組動物同樣進行肌肉注射，但注射的不是藥物而是同等劑量的生理鹽水，以便排除肌肉注射生理鹽水可能產(chǎn)生的影響； 負對照組動物則不經(jīng)任何處理的實驗動物，并與實驗組動物和正對照組動物在相同的環(huán)境和條件下飼養(yǎng)，作為空白對照。 當然，還有一些其他的設立對照組的方法，可根據(jù)實驗的需要進行設置。 —— 一般觀察一個藥物或者某種外界因素對實驗動物的影響需要設置3組對照——空白對照組（負對照組）、模型對照組（正對照組）和陽性對照組。 空白對照組：指不經(jīng)任何處理的實驗動物，目的是為了突出正常動物與疾病動物之間的差別，來判斷造摸是否成功。 模型對照組：即疾病動物模型，給予陰性（溶劑或賦形劑）處理，目的是與實驗處理組相比，排除假陽性結果。 陽性對照組：通常是給予疾病模型動物已知應該有效的藥物或者其他有效因素的處理，目的是排除假陰性結果。 除了設置上述對照組外，還需加上處理因素那一組，一般設置劑量梯度，最好是設計3個以上，以形成劑量效應。目的是為了考察藥物是否具有劑量依賴性，也是藥效的一種表現(xiàn)。 綜上，建議分組是： （1）空白對照組； （2）單純模型組 （3）模型對照組； （4）陽性對照組（模型+陽性藥物模型）； （5）模型+低劑量藥物； （6）模型+中劑量藥物； （7）模型+高劑量藥物。 注：并非每一個實驗都能找到陽性藥，因此，也不是每一個實驗都需要設置陽性對照組； 如何分？——隨機分配 確定了分幾個組，接下來，就講講怎么分？ 進行動物實驗時，統(tǒng)計學要求各實驗組間除實驗處理因素外，其它條件都完全相同，但事實上不可能完全做到，就是同一種動物而言，即使品系、年齡、窩別、性別、生活條件完全一致，對藥物的反應仍不可能完全一致，差異是絕對的，一致是相對的。 減少差異的辦法除精選實驗動物(或材料)外，就是實行嚴格的隨機原則進行安排，使正性和負性影響隨機地分配到各組，得到平衡，而不受任何主觀愿望的影響。 因此，實驗動物分組應嚴格按照隨機分組的原則進行，使每只動物都有同等機會被分配到各個實驗組中與對照組中去，盡量避免人為因素對實驗造成的影響，從而增加研究結論的可靠性。 隨機絕不是隨便，不是說隨意指定實驗動物應該屬于哪個分組，這種辦法是根據(jù)研究者意愿分組，與隨機還是有非常大的差異。為避免人為因素，常需要利用隨機數(shù)字法以實現(xiàn)隨機分組。 根據(jù)不同的實驗目的、實驗對象，常用的方法有：配對比較法隨機分組，完全隨機分組、隨機區(qū)組分組等。 01 配對比較法隨機分組 操作步驟：在分配動物之前，先將動物按性別、年齡、體重、胎別或其它有關因素加以配對，以基本相同的兩個動物為一對配成若干對；然后，再將每一對動物隨機分配于兩組中。 如，20只動物分成A、B兩組，將動物按如上所述方法分成十對，每對編號l、2，從隨機數(shù)字表連續(xù)抄錄十個數(shù)，奇數(shù)則該對第一只動物入A組，第2只入B組；如為偶數(shù)，則該對第一只動物入B組，第2只入A組。 優(yōu)點：兩組動物的胎別、性別、年齡以及體重等根本情況也基本相同，從而盡可能減少兩組動物的生物差異性。 適用范圍：在將實驗動物分成兩組時，適用。 02 完全隨機分組 操作步驟： （1）編號：將實驗動物從1到N編號，一般可以可按體重大小編號。打開Excel軟件，在“A1”單元格輸入“1”，用“Ctrl”鍵和填充柄在“A列”拖拽出所需的動物號。 （2）獲取隨機數(shù)字：在“B1”單元格單擊"插入"菜單中選取“fx”,在對話框中選擇“rand”后“確定”，粘貼上第1個隨機號。用“填充柄”拖拽，使所有動物均編上不同的隨機號，對已產(chǎn)生的隨機號用“復制”和“選擇性粘貼”“數(shù)值”加以固定。 （3）將隨機數(shù)排序：在“數(shù)據(jù)”菜單中選取“排序”，以B列隨機號“遞增”排序，將動物號按附上的隨機號的順序由小到大重新排列。 （4）分組：然后按先后順序，依次分為1、2、3、4...等組。 優(yōu)點：操作簡單； 缺點：若動物間有較大差異，如體重區(qū)間較大，則不適用這種方法。 適用范圍：所有動物必須是“同質”或者近似“同質”。也就是說所有的動物性別、體重及其他相關因素（如荷瘤體積）是一樣的，或是近似的。 03 隨機區(qū)組分組 然而如果一批小鼠中，小的有18g的，大的有30g的，體重相差比較大，若按上述完全隨機方法分配到各組，很可能有的組分到體重特別大的，有的組分到特別小的，這樣難以保證平均分配。這時，則可采用隨機區(qū)組設計。 隨機區(qū)組設計：先將一定數(shù)目和比例的動物分為幾個區(qū)組（一般＞3），如體重相近的動物、性別一致的動物等。區(qū)組的長度最好為組數(shù)的2倍以上，太小易造成不隨機，如有4個組，則區(qū)組長度最好選擇8以上。 舉例： 有40只SD大鼠，重量在180-220克之間，需要分為4組，即每組10只（甲乙丙�。�，應先將動物按體重配成若干個區(qū)組，再把每區(qū)組動物隨機分配各組。 （1）首先，進行大鼠稱重，按順序排序； （2）分區(qū)組：嘗試可將這些大鼠按體重分為4個區(qū)組（假設180~190g/8只，190-200g/12只，200-210g/16只，210-220g/4只），即4窩，分區(qū)時每窩的數(shù)量至少大于4； （3）編號：依次對這4窩大鼠編號，第一窩1、2、3、4…8，以此類推，編號到40； （4）隨機分配區(qū)組1：將這8只隨機分配給4組，每組各2只，分組方法即采用上述|“完全隨機分組”方法分配到每個組； （5）隨機分配剩余3個區(qū)組，方法同上。 優(yōu)勢：區(qū)間分組將保證了實驗組間的生物差異減到了最小，遵循了一致性原則與隨機性原則，使實驗結果更具有統(tǒng)計學意義。 備注：有時我們會碰到多個因素，則需要依次分區(qū)，如：40只體重差異較大的小鼠，雌雄不一，此時我們不能只按照體重區(qū)組分配，需要先把雌雄分開，然后各自按體重分組。 綜上可以看到，實驗動物分組需要遵循對照和隨機的原則，這樣才可以保證數(shù)據(jù)更加具有科學性和統(tǒng)計意義。 |
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2樓2024-07-03 21:17:45
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