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如何高效構(gòu)建肥胖模型（DIO）
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推薦動(dòng)物：C57BL/6J雄性小鼠（有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，雌鼠肥胖造模效果慢，成模難） 造模周期：一般8-12周，12周最佳。 通常情況：6周齡（20g左右）C57BL/6J小鼠開始造模，飼喂高脂飼料至13-14周齡，體重可達(dá)35g；飼喂至16周齡體重可達(dá)40g左右；飼喂至20周齡體重可達(dá)46g-48g左右。 飼料選擇： 小鼠推薦使用60%脂肪供能高脂飲食（脂肪含量35%）。 大鼠推薦使用45%脂肪供能高脂飲食（脂肪含量24%）。 飼喂時(shí)讓其自由采食即可，注意采食量數(shù)據(jù)和體重?cái)?shù)據(jù)監(jiān)測。測量肥胖相關(guān)指標(biāo)：記錄小鼠體長，根據(jù)公式計(jì)算：Lee‘指數(shù)=體重（g）/體長（cm）*103 日常飼喂 1）飼養(yǎng)密度控制：如小鼠，建議3-5只每籠，3只最佳； 2）飼喂方式：每2-3天更換飼料一次，并將籠盒剩余的飼料全部替換掉，保持新鮮度；環(huán)境溫度24-25℃利于增肥； 3）勤換墊料：舒適的生活環(huán)境也至關(guān)重要，優(yōu)先選用優(yōu)質(zhì)刨花墊料，一周1-2次更換必不可少，若發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采食量減少，飼料損耗加大，籠內(nèi)墊料中出現(xiàn)較多碎料，建議及時(shí)更換墊料，可以有效改善； 4）高脂飼料飼喂注意：因其顆粒軟，嚙齒類動(dòng)物需要磨牙，建議放置磨牙棒或者定期剪牙齒，這樣也能減少了飼料的浪費(fèi)； 5）減少人為干擾：灌胃、采血、注射等實(shí)驗(yàn)操作，一定程度上會(huì)影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生理狀態(tài)，導(dǎo)致采食量下降，生長受助；如非必須，應(yīng)盡量減少。 如何進(jìn)行有效儲(chǔ)存 1）4度冷藏保存3個(gè)月，-20冷凍保存6個(gè)月； 2）4度放置的可直接投喂，-20度冷凍的需提前一夜放置冷藏解凍后才能投喂； 3）如沒有足夠的冰箱空間，若不是高脂純化型飲食，常溫下（溫度30℃以內(nèi)，濕度75%以下），且飼料處于經(jīng)過滅菌、真空狀態(tài)，可放置一個(gè)月，但已開封必須冷藏保存。 其他注意事項(xiàng) 1）采食量監(jiān)控很重要，每次換食需要記錄； 2）若采食量趨于穩(wěn)定，突然某個(gè)階段出現(xiàn)明顯下滑，有可能是進(jìn)入了厭食期（多發(fā)于高脂飼養(yǎng)），或者是哪個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，需要排查； 3）整個(gè)實(shí)驗(yàn)周期，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的狀態(tài)需要多加關(guān)注，毛色、體重等。 造模成功評價(jià)指標(biāo)： 喂養(yǎng)16周末大鼠的體質(zhì)量超過平均體質(zhì)量的1.4倍，即為肥胖大鼠。體脂率=(左、右腎周脂肪+左右附睪脂肪  /體質(zhì)量×100%。造模后觀察指標(biāo)： 運(yùn)動(dòng)6周后測試大鼠體質(zhì)量、肝質(zhì)量、心臟質(zhì)量、體脂率、血脂、脂酶和氧化應(yīng)激指標(biāo)，脂肪組織病理切片觀察脂肪細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。 |
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