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科研戰(zhàn)神·王鐵蟲 (小有名氣)
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動物造模 | 食道癌模型的構(gòu)建
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食道癌（esophageal carcinoma，EC）是一種常見的消化道惡性腫瘤，嚴重威脅人類健康。根據(jù)2018年全球癌癥統(tǒng)計顯示，食道癌的發(fā)病率和死亡率分別在癌癥相關(guān)數(shù)據(jù)排在第7位和第6位。食道癌被認為是“沉默”癌癥，早期癥狀不明顯，超過一半的病人確診時已是晚期且出現(xiàn)可見的轉(zhuǎn)移灶。中晚期的食道癌患者5年生存率低于15％，即便手術(shù)切除腫瘤也無法根治，術(shù)后5年生存率僅有15％-24％，因此目前食道癌仍是無法治愈。 動物模型不僅有助于理解食管癌的分子發(fā)病機制，而且還有助于為疾病制定治療干預(yù)措施。常用動物模型為誘發(fā)性食管癌動物模型。 動物的選擇 主要包括大鼠、小鼠。 造模方法 一、包括亞硝胺致癌模型、4-NQO誘導(dǎo) 致癌模型 1 亞硝胺致癌模型 造模方法：亞硝胺化合物是實驗室動物中最有效的致癌誘變劑，最常用的是甲基芐基亞硝胺(NMBA)和對甲基戊基亞硝胺(MNAN/AMN)。如將NMBA溶于生理鹽水中，配制成0.15%NMBA溶液，按照3.5mg/kg皮下注射，每周2次，連續(xù)10周，建立模型。 優(yōu)缺點：潛伏期短，重現(xiàn)性高，與人類癌癥發(fā)生過程相似。但是成本高，需使用高劑量致癌劑誘導(dǎo)致癌，致癌劑具有毒性。 注意：主要誘發(fā)大鼠食管癌模型，很少用于小鼠。 2 4-NQO誘導(dǎo)致癌模型 造模方法：4-NQO(4-硝基喹琳-1-氧化物)是一種水溶性的喹啉衍生物，將4-NQO配制成100μg/ml的溶液，作為小鼠的飲用水讓小鼠自由飲用，至16周改為去離子水，22周成功建模。 優(yōu)缺點：致癌率高，與人類癌癥發(fā)生過程相似。但是周期長，主要誘導(dǎo)鱗狀細胞癌。 注意：主要誘發(fā)小鼠口腔、食管癌模型 二、PDX模型 造模方法：將人食管癌細胞系或食管癌組織塊直接移植到免疫缺陷小鼠皮下，建立模型，常用的人食管癌細胞株有EC109、KYSE510、KYSE150、KYSE30、TE-1、TE-5、Case17等，常用的免疫缺陷鼠為裸鼠、SCID鼠、NOD/SCID小鼠和NSG小鼠。 優(yōu)缺點：移植性動物模型可以模擬人體內(nèi)腫瘤微環(huán)境研究食管鱗癌在體內(nèi)的發(fā)生發(fā)展過程，多用于研究食管鱗癌生長、轉(zhuǎn)移等機制。針對早期研究多采用異位移植模型，具有制備成功率高、成瘤快等優(yōu)勢，但較少發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移，限制了進一步的研究應(yīng)用。且成瘤周期也是限制移植動物模型發(fā)展的一個重要因素，移植型動物模型仍是目前應(yīng)用最為廣泛的食管鱗癌動物模型。 三、轉(zhuǎn)基因食管癌模型 利用基因工程技術(shù)，如CRISPR/Cas9技術(shù)，將基因轉(zhuǎn)入或敲除，構(gòu)建轉(zhuǎn)基因食管癌動物模型，常用的食管癌基因工程小鼠主要有：Cyclin D1轉(zhuǎn)基因鼠、p53基因工程鼠、P120-連環(huán)蛋白缺陷小鼠、p53和Brcal基因聯(lián)合敲除、p53基因敲除聯(lián)合Cyclin D1過表達。 總結(jié) 動物模型在腫瘤研究中起著重要作用，與細胞實驗相比，能更好地了解各種分子機制之間的轉(zhuǎn)移和腫瘤宿主之間的相互作用，闡明各種相關(guān)疾病的病理生理學，并間接促進新型抗腫瘤干預(yù)措施的開發(fā)。盡管實驗動物與人類基因組、基因調(diào)控、細胞類型、器官結(jié)構(gòu)與組成、疾病類型等方面是有一定差別的，但如何提升動物模型與人類疾病的相似性是實驗動物科學根本追求之一。 本文來源于MDL科研助手，版權(quán)歸原作者所有，授權(quán)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系原作者。文章只為學術(shù)新聞信息的傳播，不代表本公眾號觀點。如有侵權(quán)請聯(lián)系刪除。 |
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