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超困困狗g新蟲(chóng) (小有名氣)
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干貨分享 | 一文了解免疫組化(IHC)是什么?
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免疫組化(immunocytochemistry,IHC)可以用來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)的抗原,對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。免疫組化在病理診斷上的應(yīng)用是在上個(gè)世紀(jì)七十年代開(kāi)始的,目前其在病理診斷中的應(yīng)用非常廣泛,其已是組織形態(tài)學(xué)研究中不可或缺的一部分。 免疫組化的原理 免疫組化的原理是依賴抗原和抗體之間的特異性結(jié)合標(biāo)示靶點(diǎn)分子。先將組織細(xì)胞或細(xì)胞中的某一種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)作為抗原,通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性抗體,在以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體是透明無(wú)色的,故需要借助于組織化學(xué)的方法將抗原-抗體結(jié)合的部位顯現(xiàn)出來(lái),以達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定位,定性及相對(duì)量的研究。 免疫組化的方法 采用免疫組化染色法,具體步驟為: 常規(guī)制備涂片制備 TBS緩沖液洗滌5min*3次 第一抗體,4℃冰箱過(guò)夜 TBS緩沖液洗滌,5min*3次 第二 抗體,37℃,30min TBS緩沖液洗滌,5min*3次。⑦ S-P復(fù)合物,37 ℃,30min TBS洗滌液洗滌,5min*3次 DAB顯色 流水洗滌 蘇木素復(fù)染,酒精脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封固。結(jié)果判定:細(xì)胞膜、胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性(+);深棕色顆粒為強(qiáng)陽(yáng)性(++);未顯色者為陰性(-) |
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