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慢性難愈合創(chuàng)面模型構(gòu)建
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造模方法 一 創(chuàng)傷性潰瘍模型 常用皮膚切除+激素法。 造模方法 大鼠適應性喂養(yǎng)1周，麻醉后，在正中偏上的背部做一個直徑2cm(可選擇硬幣或瓶蓋) 標識，常規(guī)備皮并無菌消毒，切開標記處的全層皮膚至筋膜層，最后肌內(nèi)注射一定量的醋酸氫化可的松。 優(yōu)缺點 因其較易操作，所以實驗常用此方法，但缺乏一個可靠的成功檢測標準。感染是慢性創(chuàng)面的普遍特征，慢性創(chuàng)面中病原菌檢測陽性率達81.03%，主要為大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌，然而在實驗中普遍未應用病原菌的檢測標準，因而很難推測模型創(chuàng)面是否與臨床上難愈合創(chuàng)面一致。 二 糖尿病潰瘍模型 采用鏈脲佐菌素(STZ)誘導致糖尿病模型+全層皮膚缺損法。先用鏈脲佐菌素(STZ)對胰島素造成不同程度的破壞，使胰島素分泌相對不足或絕對不足而建立糖尿病模型。 造模方法 SPF級Wistar大鼠高糖高脂飼料喂養(yǎng)1周后，禁食12h，腹腔注射STZ(60mg/kg)，3d后每天測定大鼠的血糖，采用尾部靜脈血測定，7d后若大鼠的非空腹血糖大于16.7mmol/L即可認為糖尿病模型制作成功；再制作創(chuàng)面：大鼠麻醉后，在正中偏上的背部兩側(cè)各做一個直徑2cm的圓形標記，備皮及消毒，手術(shù)剪切開皮膚深達筋膜層，造成皮膚缺損創(chuàng)面；最后在造模區(qū)接種金黃色葡萄球菌。一般菌的數(shù)量是106/g組織。 注意事項 1、在此造模的過程中應該注意創(chuàng)面最好選擇背部，面積約為2cm×2cm大小，以免過大超過大鼠耐受范圍；血糖至少 16.7mmol/L以上，過低不符合糖尿病體征，過高易致大鼠死亡。 2、STZ具有對組織毒性小、動物存活率高等特點，廣泛應用于構(gòu)建糖尿病模型。 3、此模型能體現(xiàn)出臨床糖尿病難愈合創(chuàng)面體征，但具體流程繁瑣，操作較難，且整體造模成本高。 三 壓瘡模型 壓瘡即褥瘡，常發(fā)生于老年、癱瘓致使長期臥床的患者中，骨隆突是疾病多發(fā)部位。其中缺血-再灌注壓瘡造模方法最符合臨床發(fā)病機制及疾病特征。 造模方法 大鼠麻醉后，于后肢背側(cè)備皮，將大鼠置于木板，呈仰臥位固定四肢，使壓強為30kPa的磁鐵或壓力裝置施壓于雙側(cè)后肢膝關(guān)節(jié)小腿骨隆突處局部皮膚。該模型制作采用缺血-再灌注損傷原理，每個循環(huán)中，包括2h的缺血期和30min的再灌注期，3個循環(huán)/d，連續(xù) 2d。當受壓部位出現(xiàn)紅、腫、熱等炎癥反應，繼發(fā)有紅斑、水泡、潰瘍時可認為造模成功。 優(yōu)點 此方法符合臨床壓瘡發(fā)生實際情況，可操作性強，成本不高。 用途 此模型用于動物壓瘡實驗參考。 四 感染性潰瘍 感染是造成創(chuàng)面遷延難愈的重要因素，常用皮損法+涂菌法。 造模方法 大鼠麻醉后，在大鼠的背部脊椎兩側(cè)各做一個直徑2cm的圓形標記，切開全層皮膚并深達筋膜層，創(chuàng)面充分止血后種植一定濃度的大腸桿菌或金黃色葡萄球菌，3d后創(chuàng)面附有膿性分泌物，滲液較多，皮緣紅腫，皮溫升高，即可認為造模成功。 優(yōu)點 制作方法簡單，成本低，成功率較高。 用途 應用于感染性創(chuàng)面的實驗研究。 |
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