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基礎(chǔ)生物實(shí)驗(yàn)外?/a>新蟲 (初入文壇)
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[交流]
動(dòng)物模型 | 新生兒高膽紅素血癥
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造模方法 一、腹腔或靜脈注射膽紅素模型 腹腔或靜脈注射膽紅素，是最常見的建模方法。 靜脈注射膽紅素的造模方法：采用不同劑量膽紅素(15mg/kg、30mg/kg和50mg/kg) 頸靜脈注7d齡SD大鼠，探討黃疸新生兒免疫功能紊亂易發(fā)生感染的原因，結(jié)果顯示，隨著濃度變化出現(xiàn)不同程度的皮膚黃染，但1h后均出現(xiàn)皮膚黃染減退。 優(yōu)缺點(diǎn)：靜脈注射的方法膽紅素在體內(nèi)存留時(shí)間過短，不能模擬高膽紅素持續(xù)損害的過程，且對(duì)7d齡大鼠行置管靜脈注射的操作性較差。但是，靜脈注射方法雖然操作難度大，但干擾因素小，可通過血液循環(huán)分布各個(gè)器官，適用于對(duì)多個(gè)系統(tǒng)的研究，尤其是免疫系統(tǒng)的研究。 腹腔注射膽紅素的造模方法：選用3d齡新生SD大鼠腹腔注射膽紅素，以每天2次連續(xù)注射3d的方式，建立高膽紅素血癥模型，結(jié)果顯示50μg/g和100μg/g 濃度，亦可引起膽紅素腦病的發(fā)生。 優(yōu)缺點(diǎn)：腹腔注射方法相對(duì)靜脈注射操作較為簡單，建模成功率高，但與靜脈注射方法存在同樣的缺點(diǎn)是: 均不能良好的模擬新生兒高膽紅素血癥是紅細(xì)胞破壞增加的致病原因。 二、皮下或腹腔注射鹽酸苯肼致溶血模型 建模原理：利用鹽酸苯肼可破壞動(dòng)物體內(nèi)的紅細(xì)胞，導(dǎo)致溶血，造成膽紅素大量堆積，超過新生鼠肝臟的代謝能力，未結(jié)合膽紅素水平急劇升高，與新生兒高膽紅素血癥發(fā)病病理生理機(jī)制相似，能良好的模擬新生兒高膽紅素血癥。 造模方法：有研究者選用7d齡Wistar大鼠皮下注射鹽酸苯肼溶血造成高膽紅素血癥，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示皮下注射鹽酸新生大鼠血清總膽紅素、直接膽紅素、間接膽紅素較對(duì)照組明顯升高，出現(xiàn)嚴(yán)重運(yùn)動(dòng)障礙，但對(duì)耳蝸毛細(xì)胞、螺旋神經(jīng)節(jié)無明顯損傷。 缺點(diǎn)：鹽酸苯肼作為化學(xué)藥物，除損傷紅細(xì)胞外，也可以損傷免疫細(xì)胞，影響免疫系統(tǒng)，故該種方式不適用于膽紅素對(duì)免疫系統(tǒng)的損傷研究。 三、Gunn大鼠模型 Gunn大鼠為編碼葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的基因缺陷大鼠，類似人類Crigler-Najjar綜合征I。 建模原理：新生鼠體內(nèi)游離的膽紅素不能轉(zhuǎn)化成結(jié)合型膽紅素被排泄而出現(xiàn)黃疸，因此，Gunn 大鼠多被用于開展對(duì)遺傳性葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶缺陷和非溶血性高膽紅素血癥的模型研究，但是 Gunn 大鼠的高膽紅膽紅素的濃度往往達(dá)不到核黃疸的程度。 造模方法：有研究者建立ugt1位點(diǎn)外顯子4基因突變（ugt-/-）小鼠，該類型小鼠膽紅素濃度可達(dá)到正常鼠的50-60 倍，病理結(jié)果可見腦組織黃染。 缺點(diǎn)：此動(dòng)物模型研究成本較高，基因缺陷是否造成免疫系統(tǒng)缺陷尚不明確。 四、延髓注射膽紅素模型 造模方法：經(jīng)新生大鼠小腦延髓池注射膽紅素溶液的方法制作膽紅素腦病的動(dòng)物模型，均出現(xiàn)不同程度的神經(jīng)行為異常，如呼吸不規(guī)則、進(jìn)食少、反應(yīng)差、甚至抽搐，與臨床膽紅素腦病的表現(xiàn)類似。 驗(yàn)證：光鏡下可見腦組織膽紅素黃染，海馬神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生不同程度的凋亡和壞死。 優(yōu)缺點(diǎn)：該方法可以減少血腦屏障功能的影響，可更直接地研究膽紅素的神經(jīng)毒性，雖受血腦屏障功能狀態(tài)的影響較小，可更直接地研究膽紅素的神經(jīng)毒性。但是對(duì)新生大鼠小腦延髓池注射本身即對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)是一種外傷性損害，操作難度較大，易誘發(fā)出血損傷，動(dòng)物建模成功率較低。 總結(jié) 目前建立新生兒高膽紅素血癥模型的建模方法眾多，各有利弊，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?shí)驗(yàn)室條件進(jìn)行選擇。應(yīng)根據(jù)所研究內(nèi)容，選擇與所研究系統(tǒng)疾病發(fā)病機(jī)制、代謝特點(diǎn)相似，干擾因素相對(duì)較小的新生兒高膽紅素血癥動(dòng)物模型。 |
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