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科研狗的日常吖新蟲(chóng) (初入文壇)
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微生物學(xué)常用培養(yǎng)基配方大全
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1.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(培養(yǎng)細(xì)菌用) 牛肉膏3g/L，蛋白胨5g/L，NaC1 10 g/L，瓊脂1.5~2.0 g/L，pH 7.0~7.2。121℃滅菌20 min。JSENB品牌微生物培養(yǎng)原料一站供應(yīng)。 2.高氏(Gause)1號(hào)培養(yǎng)基(培養(yǎng)放線菌用) 可溶性淀粉20 g/L，KNO3 1 g/L，NaCl 0.5 g/L， K2HPO4 0.5 g/L，MgSO4 0.5 g/L， FeSO4 0.01 g/L，瓊脂 20 g/L，pH 7.2~7.4。 配制時(shí)，先用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀，倒入煮沸的水中，在火上加熱，邊攪拌邊加入其他成分，溶化后，補(bǔ)足水分至1000 ml。121℃滅菌20 min。 3. 查氏(Czapek)培養(yǎng)基(培養(yǎng)霉菌用) NaNO3 2 g/L， K2HPO4 1 g/L，KC1 0.5 g/L，MgSO4 0.5 g/L，F(xiàn)eSO4 0.01 g/L，蔗糖30 g/L，瓊脂15~20 g/L，pH自然。121℃滅菌20 min。 4.馬丁氏(Martin)瓊脂培養(yǎng)基(分離真菌用) 葡萄糖10 g，蛋白胨5 g，K2HPO4 1 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，1/3000孟加拉紅(rose bengal，玫瑰紅水溶液)100 ml，瓊脂15~20 g，蒸餾水800 ml,115℃滅菌 30 min。 臨用前加入過(guò)濾除菌的0.03%鏈霉素稀釋液100 ml，使鏈霉素的終濃度為30 μg/ml。 5.馬鈴薯培養(yǎng)基(簡(jiǎn)稱 PDA)(培養(yǎng)真菌用) 馬鈴薯200 g/L，蔗糖(或葡萄糖)20 g/L，瓊脂15~20 g/L，pH自然。121℃滅菌30min(若為葡萄糖則在115℃滅菌30 min)。 馬鈴薯去皮，切成塊煮沸30 min，然后用紗布過(guò)濾，再加糖及瓊脂，熔化后補(bǔ)足水至1000 ml。 6.麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基(培養(yǎng)真菌用) 1)取大麥或小麥若干，洗凈后浸泡6~12 h，置15℃陰暗處，上面蓋紗布一塊，每日早、中、晚各淋水一次，待其發(fā)芽，麥根伸長(zhǎng)至麥粒的兩倍時(shí)，停止發(fā)芽，攤開(kāi)曬干或烘干備用。 2)將干麥芽磨碎，1份麥芽加4份水，置65℃水浴中糖化3~4 h，可用碘滴定糖化程度。加水約20 ml調(diào)勻，至產(chǎn)生泡沫，然后倒在糖化液中攪拌煮沸。 3)煮沸后的糖化液用4~6層紗布過(guò)濾，濾液如混濁不清，可用蛋白澄清，即將一個(gè)雞蛋白加水約20 ml，調(diào)勻至生泡沫時(shí)為止，然后倒在糖化液中攪拌煮沸后再過(guò)濾。 4)將濾液稀釋到5~6波美度，pH約6.4，加入2%瓊脂即成。121℃滅菌30 min。 7.無(wú)氮培養(yǎng)基(培養(yǎng)自生固氮菌、鉀細(xì)菌等) 甘露醇(或葡萄糖)10 g/L，K2HPO4 0.2 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，NaC1 0.2 g/L，CaSO4·2H2O 0.2 g/L，CaCO₃ 5 g/L，pH 7.0~7.2。115℃滅菌30 min。 8.半固體肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基100 ml，瓊脂0.35~0.4 g，pH 7.6，121℃滅菌20min。 9.合成培養(yǎng)基 偏磷酸銨1 g/L，KCl 0.2 g/L，MgSO4·7H2O 0.2 g/L，豆芽汁10 ml，瓊脂20 g/L。pH 7.0。 加12 ml 0.04%的溴鉀酚紫(pH 5.2~6.8，顏色由黃變紫，作指示劑)。121℃滅菌 20 min。 10.豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培養(yǎng)基 黃豆芽100 g/L，蔗糖(或葡萄糖)50 g/L，pH自然。 稱新鮮豆芽100 g放入燒杯中，加水1000 ml，煮沸約30 min，用紗布過(guò)濾。加水補(bǔ)足原量，再加入蔗糖(或葡萄糖)50 g，煮沸熔化。121℃滅菌20 min或115℃滅菌30 min。 11.油脂培養(yǎng)基 蛋白胨10 g/L，牛肉膏5 g/L，NaCl 5 g/L，香油或花生油10 g/L，1.6%中性紅水溶液1 ml，瓊脂15~20 g/L，pH 7.2。121℃滅菌 20 min。 配制時(shí)，調(diào)好pH后，再加入中性紅，分裝時(shí)，需不斷攪拌，使油滴均勻分布于培養(yǎng)基中。 12.淀粉培養(yǎng)基 蛋白胨10 g/L，牛肉膏5 g/L，NaC1 5 g/L，可溶性淀粉2 g/L，瓊脂15~20 g/L。JSENB品牌微生物培養(yǎng)原料一站供應(yīng)，溶解淀粉時(shí)可參照高氏1號(hào)培養(yǎng)基的配制方法。 13.明膠培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨液100 ml，明膠12~18 g。 在水浴鍋中將上述成分熔化，不斷攪拌。溶化后調(diào)pH 7.2~7.4。121℃滅菌30 min。 14.蛋白胨水培養(yǎng)基(用于吲哚試驗(yàn)) 蛋白胨10 g/L，NaCl 5 g/L，pH 7.6。121℃滅菌 20 min。 15.糖發(fā)酵培養(yǎng)基(用于細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)) 蛋白胨水培養(yǎng)基1000 ml，1.6%溴鉀酚紫乙醇溶液1~2 ml，pH 7.6。 另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10 ml。 1)將上述含指示劑的蛋白胨水培養(yǎng)基(pH 7.6)分裝于試管中，在每管內(nèi)放一倒置的小玻璃管，使其充滿培養(yǎng)液。 2)將已分裝好的蛋白胨水和20%的各種糖溶液分別滅菌，蛋白胨水于121℃滅菌20 min，糖溶液則于115℃滅菌30 min。 3)滅菌后，以無(wú)菌操作將濃度為20%的無(wú)菌糖溶液加入蛋白胨水中(按每10 ml培養(yǎng)基中加入20%的糖液0.5 ml，使其終濃度為1%)。 |
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