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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)
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ELISA試劑盒價(jià)格是通過酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來檢測(cè)特定物質(zhì)的試劑盒。試劑盒中會(huì)有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品，在酶標(biāo)條中通過固相的抗原或抗體，酶標(biāo)記的抗原或抗體，酶作用的底物反應(yīng)�？尚纬蓸�(biāo)準(zhǔn)曲線從而進(jìn)行試驗(yàn)樣品的測(cè)定。檢測(cè)不同的物質(zhì)有對(duì)應(yīng)不同的試劑盒。 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)： 優(yōu)點(diǎn)：操作方便，實(shí)驗(yàn)可靠 缺點(diǎn)：1只是診斷的輔助手段，特異性和靈敏性有待提高。 2操作過程有些繁瑣，反應(yīng)血藥時(shí)間，不能一蹴而就。 相信經(jīng)常用elisa試劑盒做實(shí)驗(yàn)的人都知道，有四種常用的方法來檢測(cè)，他們分別是直接法、間接法、雙抗體夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法。今天給大家分享下他們的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。 1.直接法（direct ELISA） 將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。 優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)短，因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。 缺點(diǎn)：試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記，但不是每種抗體都適合做標(biāo)記，費(fèi)用相對(duì)提高。 2.間接法（indirect ELISA） 此測(cè)定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測(cè)定抗原量。 優(yōu)勢(shì)：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測(cè)定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它*多的免疫反應(yīng)性。 缺點(diǎn)：交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。 3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA） 被檢測(cè)的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測(cè)抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測(cè)定抗原的量；或不標(biāo)記，再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測(cè)定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競(jìng)爭(zhēng)相同的抗原結(jié)合部位。 優(yōu)勢(shì)：高靈敏、高專一性，抗原無(wú)須事先純化。 缺點(diǎn)：抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。 4.競(jìng)爭(zhēng)法（competitive ELISA） 樣本里的抗原（自由抗原）和純化并固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一起競(jìng)爭(zhēng)相同的抗體，當(dāng)樣品里的自由抗原越多，就可以結(jié)合越多的抗體，而固定抗原就只能結(jié)合到較少的抗體，反之亦然。經(jīng)清洗步驟，洗去自由抗原和抗體的復(fù)合物，只留下固定抗原和抗體的復(fù)合物，拿來與只有固定抗原的對(duì)照組結(jié)果相比較，根據(jù)呈色差異就可計(jì)算出樣品里的抗原含量。 優(yōu)勢(shì)：可適用比較不純的樣本，而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。 缺點(diǎn)：整體的敏感性和專一性都較差。 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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