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科研戰(zhàn)神·王鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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離子抑制
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離子抑制 當(dāng)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術(shù)首次被引入分析化學(xué)領(lǐng)域時(shí)，確實(shí)為分析化學(xué)家解決了大量的實(shí)際問(wèn)題。LC-MS具有前所未有的分析能力，特別是對(duì)于那些由于高極性和/或高質(zhì)量數(shù)而與氣相色譜-質(zhì)譜( GC-MS )不兼容的化合物。LC-MS系統(tǒng)允許在進(jìn)樣前消除衍生化步驟，節(jié)省試劑成本和時(shí)間。該技術(shù)被認(rèn)為只需要極少量的樣品便可實(shí)現(xiàn)高通量分析。由于這些原因使得LC-MS儀器在分析實(shí)驗(yàn)室的大量使用。 然而，近年來(lái)用戶(hù)已經(jīng)意識(shí)到LC-MS容易受到樣品基質(zhì)的干擾而影響最終的分析結(jié)果。Antignacetal在研究LC-MS中的離子抑制時(shí)強(qiáng)調(diào)，在生物等復(fù)雜基質(zhì)中測(cè)量痕量分析物時(shí)，重現(xiàn)性和準(zhǔn)確性可能會(huì)出現(xiàn)困難。 在過(guò)去，LC-MS技術(shù)最強(qiáng)大的營(yíng)銷(xiāo)點(diǎn)是其無(wú)與倫比的選擇性。電噴霧離子源（ESI）允許對(duì)LC流出的液體進(jìn)行簡(jiǎn)單的電離；通過(guò)離子聚焦，將特定質(zhì)荷比（m/z）的離子直接送入MS檢測(cè)器，同時(shí)消除所有"其他"離子。與LC-UV/DAD和LC-FLD等技術(shù)相比，LC-MS的這些特征提供了顯著的優(yōu)勢(shì)。 LC - MS作為一種穩(wěn)健、靈敏的定性和定量工具，能夠復(fù)雜基質(zhì)的海洋中處理痕量目標(biāo)分析物，受到分析人員的歡迎。然而，現(xiàn)在人們普遍認(rèn)為，該技術(shù)的選擇性和靈敏度會(huì)因?yàn)榛|(zhì)的影響而下降。 區(qū)分基質(zhì)效應(yīng)和干擾是必要的。干擾是一種影響分析物響應(yīng)的恒定的預(yù)先確定的誤差，與分析物的濃度無(wú)關(guān)。基質(zhì)效應(yīng)干擾分析物的響應(yīng)與分析物濃度成正比。基質(zhì)效應(yīng)是通過(guò)分析物與某些基質(zhì)成分之間的反應(yīng)而產(chǎn)生的一種物質(zhì)，它可以抑制或增強(qiáng)MS中的信號(hào)響應(yīng)。 在LC-MS技術(shù)中，采用單離子監(jiān)測(cè)( SIM )或選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)( SRM )，設(shè)置參數(shù)使譜圖中只出現(xiàn)所需m / z比值的離子，而不出現(xiàn)基質(zhì)成分(除非巧合)。然而，這些基質(zhì)成分雖然在質(zhì)譜中不顯示，但可能會(huì)改變目標(biāo)分析物的離子化效率，從而影響定量方法的效率和重現(xiàn)性。這將影響LC - MS方法的精密度和靈敏度。因此，在LC - MS方法開(kāi)發(fā)的初始階段，應(yīng)謹(jǐn)慎操作全掃描模式下的質(zhì)譜，以識(shí)別潛在的干擾物。 驗(yàn)證是現(xiàn)代分析的重要組成部分，是分析化學(xué)許多領(lǐng)域的重要法規(guī)要求。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）的《生物分析方法驗(yàn)證工業(yè)指南》要求進(jìn)行基質(zhì)效應(yīng)評(píng)估，以確保精密度、選擇性和靈敏度不受影響。雖然這些指南要求在方法驗(yàn)證中進(jìn)行基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)，但并沒(méi)有說(shuō)明進(jìn)行這種評(píng)價(jià)需要哪些程序。 由于離子抑制可能會(huì)對(duì)分析物響應(yīng)產(chǎn)生不利影響，因此離子抑制或基質(zhì)效應(yīng)研究是方法驗(yàn)證的重要組成部分。通過(guò)初步檢測(cè)，然后測(cè)量和/或從基質(zhì)中去除任何抑制干擾的離子，再加上其他驗(yàn)證要求，保證了分析的質(zhì)量。方法優(yōu)化還需考慮內(nèi)標(biāo)對(duì)目標(biāo)分析物可能具有甚至略有不同的功能和極性，因此還必須考察這些試劑的離子抑制性。 在以下情況下具有更大的離子抑制可能： 當(dāng)目標(biāo)分析物僅在復(fù)雜基質(zhì)中痕量存在時(shí)； 當(dāng)單個(gè)樣品中存在多個(gè)待測(cè)分析化合物時(shí)； 當(dāng)樣本前處理十分簡(jiǎn)單時(shí)； 當(dāng)LC流出液中存在酸或堿性緩沖液或離子對(duì)試劑時(shí)， 當(dāng)液相程序非常短時(shí)。 |
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