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LuckyZhou2鐵蟲 (小有名氣)
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如果核酸會說話之儀器篇：MerMade！
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在新冠疫情爆發(fā)后，mRNA疫苗的高效研發(fā)帶動了整個核酸藥物領(lǐng)域的高速發(fā)展，受到越來越多人的關(guān)注。國內(nèi)外資本瞄準(zhǔn)其龐大的市場空間及發(fā)展?jié)摿Γ娂姴季�，核酸藥物的研發(fā)成為全球最炙手可熱的領(lǐng)域之一。與傳統(tǒng)的小分子藥物和抗體藥物相比，核酸藥物最大的優(yōu)點(diǎn)是研發(fā)時間大幅縮短，只需通過核酸序列設(shè)計的改變，就可以快速研發(fā)出不同的藥物。 從 1983年 穆利斯發(fā)明 PCR 技術(shù)【點(diǎn)此了解析析與 PCR 之父凱利·穆利斯的故事】，到 1998年 第一款小核酸藥物獲批，再到 2023 年 mRNA 疫苗技術(shù)主要貢獻(xiàn)者斬獲諾貝爾獎，這些看似不相關(guān)領(lǐng)域的發(fā)展卻都離不開一項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)的推動：寡核苷酸固相合成 固相寡核苷酸合成原理 具體步驟如下： 脫DMT 用三氯乙酸(TCA)脫去連接在固相載體 CPG 上的羥基保護(hù)基團(tuán) DMT (二甲氧基三苯基)，獲得游離的 5’- 羥基端，以供下一步縮合反應(yīng)。 活化偶聯(lián) 將亞磷酰胺單體與四唑類活化劑混合形成亞磷酰胺四唑活性中間體并進(jìn)入合成柱，與 CPG 上游離的 5’- 羥基親和發(fā)生縮合反應(yīng)，此時合成的寡核苷酸鏈延長一個堿基。 蓋帽 縮合反應(yīng)后為了防止 CPG 上未參與反應(yīng)的 5’- 羥基在隨后的循環(huán)反應(yīng)中被延伸，避免產(chǎn)生 n-1 雜質(zhì)，常用乙�；噭ㄈ缫宜狒� N- 甲基咪唑混合物）來封閉此端羥基。 氧化 由于偶聯(lián)生成的三價亞磷酸三脂鍵仍不穩(wěn)定，易被酸、堿水解，常用碘的四氫呋喃溶液將三價磷氧化為五價磷，得到穩(wěn)定的寡核苷酸。 那么，如果實(shí)現(xiàn)這一連串的步驟呢？DNA 合成儀就是將上述一系列化學(xué)合成過程進(jìn)行自動化，精準(zhǔn)可控的設(shè)備。 BioAutomation 自 1999 年成立以來，一直是全球領(lǐng)先的核酸合成儀制造商，現(xiàn)作為 LGC Biosearch Technologies 的一部分，二十多年來其 MerMade 系列核酸合成儀深受眾多國內(nèi)外頭部分子診斷企業(yè)、寡核苷酸合成服務(wù)商及核酸藥物公司的信賴并被廣泛應(yīng)用。 MerMade核酸合成儀前沿應(yīng)用 關(guān)于 MerMade 的應(yīng)用，早在1998 年 Prof Rayner 等就在核心期刊《Genome Research》發(fā)表了通過 MerMade 進(jìn)行高通量的 Oligo 合成用于測序、PCR/RT-PCR 和雜交等多種應(yīng)用。同時，他們也用 MerMade 成功實(shí)現(xiàn)了長達(dá) 100 mer 的長 Oligo 的合成并取得了超過 99% 的耦合效率。除此之外，MerMade 的試劑消耗明顯低于市場上的其他品牌。 現(xiàn)如今，核酸藥的發(fā)展如日中天，全球的領(lǐng)軍企業(yè) Alnylam 可謂碩果累累，其發(fā)表的多篇文獻(xiàn)都有用到 MerMade 的系列合成儀完成各種 Oligo 尤其是 siRNA 的合成，進(jìn)行最新的核酸藥的研發(fā)。 |
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