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實(shí)驗(yàn)技巧：流式細(xì)胞儀細(xì)胞周期結(jié)果分析
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細(xì)胞周期是基于細(xì)胞處于不同分裂時(shí)期具有不同的DNA含量而分析細(xì)胞處于不同的時(shí)期的方法。 1、細(xì)胞周期的概念 細(xì)胞由一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束，都要經(jīng)歷相同的變化階段（即G1→S→G2→M ）周而復(fù)始地進(jìn)行活動(dòng)，細(xì)胞的這種生長、分裂循環(huán)即稱為細(xì)胞周期（cell cyc1e）。一個(gè)細(xì)胞周期包括有絲分裂期（M）和分裂間期（G1、S、G2）。盡管在各種細(xì)胞中各期所占時(shí)間都不盡相同，但相對而言M期zui短，S期卻較長。 2、分裂間期 （1）G1期 前一次有絲分裂完成到S期開始。各種與DNA復(fù)制有關(guān)的酶明顯增多，線粒體、葉綠體、核糖體增多，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在更新擴(kuò)大，高爾基體、溶酶體都增加，中心粒彼此分離、復(fù)制。 （2）S期 DNA、組蛋白合成 （3）G2期 S期結(jié)束后到有絲分裂開始。由上可以看出G2期、S期、M期反映了細(xì)胞的增殖活性，特別是G2期、S期（因M期較短）。因而，G2/M%+S%反映了細(xì)胞增殖能力。二者有無差別要進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。 3、細(xì)胞周期阻滯 對于生殖細(xì)胞及保持增殖能力的細(xì)胞（如干細(xì)胞），由于細(xì)胞不斷的增殖， 細(xì)胞總是處于從G1 、S、G2 和M 期的連續(xù)的細(xì)胞周期中。 在細(xì)胞周期的各階段， 細(xì)胞分別進(jìn)行著DNA 復(fù)制、蛋白質(zhì)合成及細(xì)胞分裂等重要的生理活動(dòng)。每一階段都是下一階段的準(zhǔn)備期， 真核細(xì)胞可以在啟動(dòng)下一個(gè)周期前監(jiān)測與一個(gè)細(xì)胞周期順利完成相關(guān)的生化事件，這包括各種體內(nèi)外因素威脅下游事件進(jìn)行時(shí)可逆地將細(xì)胞周期阻滯在特定的生理階段的能力，而這種特定的生理階段稱為檢定點(diǎn)（checkpoint） 。只有前一階段的生理活動(dòng)完成后，才能通過稱為檢定點(diǎn)的階段，進(jìn)入周期的下一步，一些突發(fā)事件引發(fā)的細(xì)胞反應(yīng)能影響驅(qū)動(dòng)細(xì)胞周期前進(jìn)的因子，從而使細(xì)胞周期停滯在檢定點(diǎn)， 這被稱為細(xì)胞周期阻滯（cell cycle arrest）。 比較相應(yīng)的細(xì)胞G1 、S、G2 期差異有無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，才能說有無細(xì)胞周期阻滯。 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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