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Anson1358鐵桿木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
使用293F細(xì)胞瞬時(shí)表達(dá)鼠源抗體未分泌到胞外,該如何改進(jìn)?
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先介紹一下情況: 我在使用pCDNA3.4載體表達(dá)一個(gè)小時(shí)的抗體以及Fab,使用的是293F細(xì)胞。經(jīng)前期摸索后抗體或Fab是可以表達(dá)的,但是分泌到胞外的很少。western blot檢測(cè)胞內(nèi)很多,胞外極少。哪位蟲(chóng)有做過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)?zāi)兀繎?yīng)該如何提高分泌到胞外的蛋白量呢? 我也嘗試過(guò)更換信號(hào)肽,但效果不明顯。蟲(chóng)友們有沒(méi)有推薦的合適信號(hào)肽?或者我需要從哪方面進(jìn)行優(yōu)化?換載體?換細(xì)胞? |

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