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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 綜合其他 » 一文了解離子抑制
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離子抑制 當液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術首次被引入分析化學領域時，確實為分析化學家解決了大量的實際問題。LC-MS具有前所未有的分析能力，特別是對于那些由于高極性和/或高質(zhì)量數(shù)而與氣相色譜-質(zhì)譜( GC-MS )不兼容的化合物。LC-MS系統(tǒng)允許在進樣前消除衍生化步驟，節(jié)省試劑成本和時間。該技術被認為只需要極少量的樣品便可實現(xiàn)高通量分析。由于這些原因使得LC-MS儀器在分析實驗室的大量使用。 然而，近年來用戶已經(jīng)意識到LC-MS容易受到樣品基質(zhì)的干擾而影響最終的分析結(jié)果。Antignacetal在研究LC-MS中的離子抑制時強調(diào)，在生物等復雜基質(zhì)中測量痕量分析物時，重現(xiàn)性和準確性可能會出現(xiàn)困難。 在過去，LC-MS技術最強大的營銷點是其無與倫比的選擇性。電噴霧離子源（ESI）允許對LC流出的液體進行簡單的電離；通過離子聚焦，將特定質(zhì)荷比（m/z）的離子直接送入MS檢測器，同時消除所有"其他"離子。與LC-UV/DAD和LC-FLD等技術相比，LC-MS的這些特征提供了顯著的優(yōu)勢。 LC - MS作為一種穩(wěn)健、靈敏的定性和定量工具，能夠復雜基質(zhì)的海洋中處理痕量目標分析物，受到分析人員的歡迎。然而，現(xiàn)在人們普遍認為，該技術的選擇性和靈敏度會因為基質(zhì)的影響而下降。 區(qū)分基質(zhì)效應和干擾是必要的。干擾是一種影響分析物響應的恒定的預先確定的誤差，與分析物的濃度無關�；|(zhì)效應干擾分析物的響應與分析物濃度成正比。基質(zhì)效應是通過分析物與某些基質(zhì)成分之間的反應而產(chǎn)生的一種物質(zhì)，它可以抑制或增強MS中的信號響應。 在LC-MS技術中，采用單離子監(jiān)測( SIM )或選擇反應監(jiān)測( SRM )，設置參數(shù)使譜圖中只出現(xiàn)所需m / z比值的離子，而不出現(xiàn)基質(zhì)成分(除非巧合)。然而，這些基質(zhì)成分雖然在質(zhì)譜中不顯示，但可能會改變目標分析物的離子化效率，從而影響定量方法的效率和重現(xiàn)性。這將影響LC - MS方法的精密度和靈敏度。因此，在LC - MS方法開發(fā)的初始階段，應謹慎操作全掃描模式下的質(zhì)譜，以識別潛在的干擾物。 驗證是現(xiàn)代分析的重要組成部分，是分析化學許多領域的重要法規(guī)要求。美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）的《生物分析方法驗證工業(yè)指南》要求進行基質(zhì)效應評估，以確保精密度、選擇性和靈敏度不受影響。雖然這些指南要求在方法驗證中進行基質(zhì)效應的評價，但并沒有說明進行這種評價需要哪些程序。 由于離子抑制可能會對分析物響應產(chǎn)生不利影響，因此離子抑制或基質(zhì)效應研究是方法驗證的重要組成部分。通過初步檢測，然后測量和/或從基質(zhì)中去除任何抑制干擾的離子，再加上其他驗證要求，保證了分析的質(zhì)量。方法優(yōu)化還需考慮內(nèi)標對目標分析物可能具有甚至略有不同的功能和極性，因此還必須考察這些試劑的離子抑制性。 在以下情況下具有更大的離子抑制可能： 當目標分析物僅在復雜基質(zhì)中痕量存在時； 當單個樣品中存在多個待測分析化合物時； 當樣本前處理十分簡單時； 當LC流出液中存在酸或堿性緩沖液或離子對試劑時， 當液相程序非常短時。 |
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