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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 綜合其他 » 倒平板小技巧
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倒平板小技巧
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培養(yǎng)基傾注溫度 1、培養(yǎng)基傾注適宜溫度約45℃。如果手心接觸裝培養(yǎng)基的三角瓶不燙，手背接觸燙，此時的溫度在45度左右，最適合倒平板。培養(yǎng)基傾注時溫度太高的話，凝固時間較長，另外皿蓋上會有大量冷凝水，不利于后續(xù)實驗。溫度太低，則容易出現倒板過程中瓶中培養(yǎng)基部分凝固的現象。如果要連續(xù)倒多個皿，尤其是在冬天，非常容易凝固，一旦凝固則需要再加熱到較高溫度才能溶化。所以建議此時開個50度的恒溫水浴，隨時可把裝培養(yǎng)基的三角瓶放進去加熱，效果會更好。 2、有些培養(yǎng)基需要加入添加成分，這些添加成分在加入前應先放置到室溫，避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。 3、目前多數實驗室培養(yǎng)基滅菌后會放置水浴或者烘箱中，需使用的時候拿出來直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時間不宜過長，靜置時間一般不超過4小時。靜置時間過長，培養(yǎng)基中瓊脂可能會少量凝固，形成類似絮狀析出。 培養(yǎng)皿中有冷凝水 培養(yǎng)皿中有冷凝水，如果只有幾滴，則影響不大，如果過多則需要引起注意。 1、倒皿前將平皿最好保持在35℃-40℃的溫度（觸手有溫熱感）。 2、當需要表面接種時，有冷凝水的平板表面容易產生蔓延菌落。這時可放在有對流的無菌凈化臺中吹干培養(yǎng)基表面，但不能過度干燥，否則培養(yǎng)過程中平板容易開裂。 3、如果是進行傾注平板計數，則可在凝固后的瓊脂表面再覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基即可。 平板傾注量 一般平板傾注量在18-20mL左右，如果培養(yǎng)時間超過48小時或者是培養(yǎng)溫度高于40℃，為防止水分過量蒸發(fā)導致平板開裂，傾注量一般是25mL左右。傾注平皿時左三圈、右三圈的輕輕晃動，注意避讓平皿蓋。 平板氣泡 倒板過程中容易出現氣泡，特別是像BS瓊脂這類需要搖勻后倒板的培養(yǎng)基。氣泡過多的話會影響結果觀察，所以在實驗操作中盡量避免或減少氣泡。 1、加熱時培養(yǎng)基融化即可，避免溫度過高產生氣泡。 2、倒平板時盡量貼著平皿壁緩慢倒入，將氣泡留在瓶子底部。 3、如果平板中有少量氣泡的話，可以把氣泡輕搖到平板壁上，這樣不會影響結果觀察。 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務內容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產物 |
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