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BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒
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BCA（Bicinchoninic acid）法是目前應(yīng)用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測(cè)定方法�；陔p縮脲反應(yīng)，即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+，產(chǎn)生一種紫藍(lán)色復(fù)合物，在562nm處有高的吸光值，該反應(yīng)產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。 BCA蛋白濃度測(cè)定法實(shí)現(xiàn)了蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的簡(jiǎn)便、靈敏、快速和穩(wěn)定性。試劑盒中提供的蛋白標(biāo)準(zhǔn)品為用戶制作標(biāo)準(zhǔn)曲線提供了便利。 BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒可用于比色皿法檢測(cè)，也可用于微孔板法檢測(cè)。前者雖需較大量（100μL）的蛋白樣品，但由于其在檢測(cè)中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:20（v/v），從而降低干擾物質(zhì)帶來的影響。后者操作簡(jiǎn)單方便，僅需少量（10-25μL）的蛋白樣品。 不過，由于其在檢測(cè)中使用蛋白樣品與BCA工作液的比率為1:8（v/v），某種程度上限制干擾物質(zhì)的承受濃度以及降低最低檢測(cè)水平。Abbkine提供三種規(guī)格的BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒#KTD3001。 BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒特點(diǎn)： 1）靈敏度高，最小檢測(cè)蛋白量可達(dá)0.2μg，檢測(cè)濃度下限達(dá)到10μg/mL。 2）速度快，比一般的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒顯色所用時(shí)間短。比傳統(tǒng)的Lowry法檢測(cè)速度約快4倍。 3）線性范圍廣，20-2000μg/mL濃度范圍內(nèi)有較好的線性范圍。 4）不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。 BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒注意事項(xiàng)： 1）使用BCA蛋白測(cè)定法測(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，因此需注意保持定時(shí)和定溫，以確保精確定量。 2）低溫或長(zhǎng)期保存，若發(fā)現(xiàn)BCA試劑A或者試劑B有沉淀發(fā)生。請(qǐng)37ºC溫育并伴隨攪拌促使其充分溶解。如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染，則應(yīng)丟棄，避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響。 3）實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，提高上樣量的精確度。 4）每次測(cè)定都需做相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，因?yàn)轱@色反應(yīng)與溫度和時(shí)間的變化有關(guān)，精準(zhǔn)的蛋白定量宜每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 5）為了安全和健康，需要穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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