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【實(shí)驗(yàn)技巧】麗春紅染色
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麗春紅（Ponceau S）染色是 WB 實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，今天就來(lái)給大家詳解麗春紅染色的作用和操作方法。 麗春紅染色作用 可用于 PVDF 膜，硝酸纖維素膜和和醋酸纖維素膜上的蛋白的檢測(cè)。 麗春紅染色原理 麗春紅帶負(fù)電荷，可以與帶正電荷的氨基酸殘基結(jié)合，同時(shí)麗春紅也可以與蛋白的非極性區(qū)相結(jié)合，從而形成紅色的條帶。 麗春紅特性 麗春紅對(duì)蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸餾水，PBS 或其它適當(dāng)溶液洗去。 為什么要用麗春紅染色？ 通過(guò)麗春紅染色可驗(yàn)證轉(zhuǎn)膜效率，及每孔上樣蛋白總量是否均等，可以幫助后續(xù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行內(nèi)參調(diào)整或問(wèn)題分析。 特別說(shuō)明：麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白檢測(cè)。 操作方法 1. 將轉(zhuǎn)印膜浸沒(méi)在麗春紅染色液中，用搖床孵育轉(zhuǎn)印膜 1-30 分鐘。 2. 取出轉(zhuǎn)印膜，用去離子水沖洗膜直到背景干凈（通常不超過(guò) 5 分鐘），條帶清晰，記錄結(jié)果。染液可以繼續(xù)用去離子水洗滌完全去除麗春紅，進(jìn)行后續(xù)的 WB 檢測(cè)。 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫(kù)與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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