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如何挑選合適的β-Actin內(nèi)參抗體?
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現(xiàn)在市場上對于內(nèi)參抗體選擇是比較多,但是也需要遵循一定的原則,那怎么去找到適合自己實(shí)驗(yàn)的β-Actin抗體呢? 首先,我們需要考慮目的蛋白的大小,我們推薦內(nèi)參要與檢測的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根據(jù)你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內(nèi)參,由于β-Actin的檢測分子量大約在42kD,因此該內(nèi)參抗體不是很適合用于檢測38kD-48kD大小目標(biāo)蛋白的WB實(shí)驗(yàn)中。 另外,雖然β-Actin是最合適的內(nèi)參抗體之一,但是在某些條件下,一些因素也會導(dǎo)致樣品間β-Actin含量的變化。特別需要注意的是,在脂肪組織里,β-Actin的表達(dá)量非常低,不適合作為內(nèi)參。 很耐用,質(zhì)量也很穩(wěn)定,購買后放了一年了,拿出來用效價還是很高,后來買了他們大包裝的,直接定制的1mg粉末,很推薦。 另外,我們還需要考慮自己的需要,特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。一般來說,應(yīng)用類型越多,在使用過程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特 異性、穩(wěn)定性以及效價都要優(yōu)于多克隆抗體。另外,抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面,也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時的稀釋比率。一個效價高的100μl β-Actin抗體(假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000,最終使用液相當(dāng)于500ml),要比效價低的1ml的β-Actin抗體(假如 WB檢測的稀釋比率是 1:200,最終使用液相當(dāng)于2ml)性價比更高。因此在選擇抗體的時候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價,即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。 公眾號:畢合生物 畢合生物(www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容:分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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