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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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[交流]
PAS染色
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一、簡介 PAS（Periodic Acid-Schiff stain）染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)，還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。其原理是過碘酸能使細胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合，紅色，定位于胞漿上。 二、染色流程 1. 切片常規(guī)脫蠟至水； 2. 蒸餾水洗1-2min； 3. 高碘酸溶液氧化10min； 4. 蒸餾水洗，甩去多余水分； 5. 雪夫（schiff）試劑染色10-15min； 6. 流水沖洗，甩去多余水分； 7. 蘇木素染液染核2-4min； 8. 流水沖洗反藍3-5min，甩干多余水分； 9. 常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固。 三、染色結(jié)果 霉菌、糖原、中性粘液物質(zhì)呈紅色，胞核呈藍色。 四、注意事項 1. 蘇木素染液建議常溫放置，染色更加； 2. 雪夫試劑臨用前半小時取出恢復(fù)室溫，未染色試劑出現(xiàn)淡紅色不能使用； 3. 如試劑盒儲存在2-8°C環(huán)境下，染色過程中試劑出現(xiàn)淡紅色屬于正常現(xiàn)象； 4. 雪夫試劑染色時間隨室溫而定，夏季室溫高，作用10min即可，冬季室溫低，則可延長至20min，雪夫試劑染色要避光； 5. 操作時做好防護，避免濺眼； 6.超過有效期不可使用。 五、 臨床應(yīng)用 隨著醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)的發(fā)展，糖原染色應(yīng)用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì) ，心肌病變及其他心血管疾病的診斷 ，糖原累積病診斷和研究 ，糖尿病的診斷和研究 ，用于某些腫瘤的診斷等。除用于糖原的鑒定和黏液的顯示外 ，還可以觀察腎小球基底膜 、結(jié)腸杯狀細胞 中性黏液物質(zhì) 、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色，為臨床診斷、分類和治療提供了重要的依據(jù)。 |
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