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胎牛血清的指標(biāo)都有哪些？
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牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。 1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。 2. 提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。 3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。 4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。 5.起酸堿度緩沖液作用。 6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。 胎牛血清都有哪些重要的指標(biāo) 一、內(nèi)毒素 內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁外壁層上的特有成分。當(dāng)細(xì)菌死亡自溶或粘附在其它細(xì)胞時，才表現(xiàn)其毒性。內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代；內(nèi)毒素含量過高，會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。國際上規(guī)定，胎牛血清的級別，應(yīng)以內(nèi)毒素水平的高低來確定，其中，特級胎牛血清的內(nèi)毒素應(yīng)<10EU/ml 二、血紅蛋白含量 胎牛血清的顏色會根據(jù)血紅蛋白含量的不同表現(xiàn)出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細(xì)胞培養(yǎng)用血清的標(biāo)準(zhǔn)是血紅蛋白含量不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高；反之，數(shù)值越低。實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。 三、總蛋白含量 胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml，數(shù)值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛；數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了。 四、pH值 根據(jù)藥典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間，并沒有什么具體依據(jù)把進(jìn)口血清和國產(chǎn)血清用7.5這個分界線界定。 五、滲透壓 胎牛血清滲透壓的檢測一般采用冰點法，滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：280-360之間 六、微生物 包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個品牌血清生產(chǎn)條件的改善提高，細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除。如CellMax胎牛血清，3次0.1um無菌過濾以后，又通過培養(yǎng)法和DNA染色法進(jìn)行支原體檢測，結(jié)果均呈現(xiàn)陰性才會放行銷售。關(guān)于噬菌體主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入，又無法過濾，很難徹底清除，但對血清質(zhì)量影響不大，不過對于工業(yè)生產(chǎn)的客戶來說，往往會采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。 七、免疫球蛋白 免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出采血時的牛齡情況，新生牛血清容易產(chǎn)生IgM，IgG的含量也偏高；胎牛血清不含IgM，IgG的含量也較低�？梢酝ㄟ^血清蛋白電泳SDS檢測。 低IgG的胎牛血清推薦適用于抗體生產(chǎn)及相關(guān)領(lǐng)域。 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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