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微生物檢測實驗倒平板的小技巧
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實驗中相信大家都經常要倒平板吧？初學者往往都倒不好，導致后續(xù)實驗出現問題。這里總結幾點小技巧供大家參考： 一、培養(yǎng)基傾注溫度 1、培養(yǎng)基的傾注時適宜溫度約45℃。培養(yǎng)基置手心感覺不燙，但是置手背感覺燙時，培養(yǎng)基溫度大約就是45℃。培養(yǎng)基傾注時溫度太高的話，凝固時間較長，另外皿蓋上會有大量冷凝水，不利于后續(xù)實驗。溫度太低則容易出現倒板過程中瓶中培養(yǎng)基部分凝固的現象。 2、有些培養(yǎng)基需要加入添加成分，這些添加成分在加入前應先放置到室溫，避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。 3、目前多數實驗室培養(yǎng)基滅菌后會放置水浴或者烘箱中，需使用的時候拿出來直接倒板。但培養(yǎng)基靜置時間不宜過長，靜置時間一般不超過4小時。靜置時間過長，培養(yǎng)基中瓊脂可能會少量凝固，形成類似絮狀析出。 4、在實驗過程中不可避免因特殊情況而導致未倒板培養(yǎng)基已凝固，凝固后培養(yǎng)基可重新加熱溶解。一般來說沸水浴或者電磁爐加熱，不能重新再滅一次菌。 二、培養(yǎng)皿中有冷凝水 一般來說，難以避免都會有幾滴，影響不大。如果過多則需要注意。 1、當需要表面接種，需要吹干平板表面冷凝水，否則容易產生蔓延菌落。可放在有對流的無菌凈化臺中吹干培養(yǎng)基表面，但不能過度干燥，否則培養(yǎng)過程中平板容易開裂。 2、如果是進行傾注平板計數，則可在凝固后的瓊脂表面再覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基即可。 三、平板傾注量 一般平板傾注量在18-20ml左右，如果培養(yǎng)時間超過48小時或者是培養(yǎng)溫度高于40℃，為防止水分過量蒸發(fā)導致平板開類，傾注量一般是25ml左右。一些培養(yǎng)皿會有刻度，按照刻度傾注即可。 四、平板氣泡 倒板過程中容易出現氣泡，特別是像BS瓊脂這類需要搖勻后倒板的培養(yǎng)基。氣泡過多的話會影響結果觀察，倒平板時盡量緩慢倒入，將氣泡留在瓶子底部。平板中有少量氣泡的話，可以把氣泡搖到平板壁上，這樣不會影響結果觀察。 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務內容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產物 |
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