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huozhazha銅蟲 (正式寫手)
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有沒有大佬懂Elisa測微生物特定酶活性的原理？ 已有1人參與
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有沒有大佬懂Elisa測微生物特定酶活性的原理？ 說明書如下：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中硝酸鹽還原酶（Nar）水平。用純化的硝酸鹽還原酶（Nar）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入硝酸鹽還原酶（Nar），再與HRP標(biāo)記的硝酸鹽還原酶（Nar）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的硝酸鹽還原酶（Nar）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中硝酸鹽還原酶（Nar）的活性濃度。 比如我想測硝酸鹽還原酶（Nar），那我測得的結(jié)果，是Nar的濃度？還是總量？還是活性？ 還有就是這種酶的測定結(jié)果和相關(guān)的基因表達(dá)有什么關(guān)系呢？ 急求，十分感謝！ |
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qzhyang2008
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2樓2023-10-04 16:38:34
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- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
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ELISA一般是測含量，測酶活性得用生化。 當(dāng)然現(xiàn)在市面上還是能找著不少用ELISA測酶活性的亂象。 ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）是一種常用的分析生物樣品中特定抗原或者抗體含量的技術(shù)。在這個測試過程中，目標(biāo)抗原或抗體會經(jīng)過專門設(shè)計的過程進(jìn)行結(jié)合和檢測，并通過酶-底物反應(yīng)產(chǎn)生可以測得的信號強(qiáng)度。這個強(qiáng)度與被測試的目標(biāo)抗原或抗體的濃度成正相關(guān)。 雖然ELISA涉及到有酶參與的反應(yīng)（通常與檢測抗體相關(guān)），但該實驗本身并不評價酶活性。其目的主要是量化特定的抗原或抗體的含量，而非測定酶的活性。 |
3樓2023-10-08 15:23:29
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