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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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[交流]
ChIP原理及應(yīng)用方向
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通過(guò)甲醛將染色質(zhì)上的DNA和目的蛋白交聯(lián); 通過(guò)超聲或酶解的方法將染色質(zhì)片段化; 包含有目的蛋白的染色質(zhì)片段通過(guò)抗體富集純化; 通過(guò)加熱解除DNA和目的蛋白的交聯(lián); 通過(guò)蛋白酶和RNA酶消化去除目的染色質(zhì)的蛋白和RNA之后,將目的DNA純化出來(lái); 得到的DNA可以通過(guò)PCR檢測(cè)目標(biāo)區(qū)域的DNA是否被目的蛋白富集,或者通過(guò)DNA測(cè)序的方式檢測(cè)目的蛋白在全基因組上的分布; ChIP原理看似簡(jiǎn)單,但要想做好ChIP ,得到高質(zhì)量的數(shù)據(jù)卻絕非易事。 ChIP的應(yīng)用方向: 1、DNA甲基化 2、蛋白質(zhì)甲基化 3、組蛋白修飾 |
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