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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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[交流]
做好細(xì)胞凍存，保證細(xì)胞質(zhì)量
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實(shí)驗(yàn)步驟 1、吸去舊培養(yǎng)液。 2、PBS沖洗3次，每次2ml。 3、吸去PBS，胰酶1.5ml，放入孵育箱，消化4min后取出觀察細(xì)胞懸浮情況。 4、3ml培液中止消化，輕輕吹打至底壁透光，制成細(xì)胞懸液。 5、吸入15ml離心管中，1000r/5min離心。 6、吸去上清，加入1ml凍存液（凍存液配制方法：DMSO和血清按1:9配制成10ml,離心管外面裹一層鋁箔避光，放入4度冰箱保存），吹打均勻，吸入凍存管中。 7、放入梯度降溫盒，-80℃冰箱過夜。 8、24h后從梯度盒取出凍存管，放入液氮罐保存（長期保存需放入液氮罐，短期3個(gè)月內(nèi)凍存放入-80攝氏度即可）。 |
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