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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 細胞科學 » 細胞消化小技巧
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細胞消化小技巧
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不一定要一次把所有細胞都要消化下來！ 晃動培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察，只要70~80%細胞都收縮了或超過適合消化時間，就該終止消化反應，如果細胞量夠即可進行后續(xù)傳代或實驗步驟；如果細胞量不夠，則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細胞，再進行一次消化反應。 不一定要吹打成完全單細胞懸液！ 一般細胞脫離培養(yǎng)底物、并經過5~10次輕柔吹打后，會在細胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細胞)，所以不需要過度延長消化時間想讓細胞完全分離成單細胞懸液。 消化效果不佳，先提升消化液濃度、再加長作用時間！ 當你選定了一種消化方式 (物理機械法除外)，發(fā)現效果不佳，首先應考慮提高EDTA或胰酶濃度，效果再不佳才加長消化的作用時間，避免細胞長時間浸泡在消化液中造成的細胞膜損傷。 （一般消化液使用：0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘；0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分鐘） 結語 細胞消化 ，是一個看似很簡單，但是有很多技術含量的步驟。消化好壞、是否污染、有無受傷，都在這短短的五六分鐘里決定。 當我們已經可以順利操作細胞培養(yǎng)實驗，接下來要思考的，就是如何讓細胞長得更健康、更均一、做出來的實驗才會更完美。 祝各位的細胞都顆顆透亮、粒粒分明、活力旺盛！ 作者：畢合生物 公眾號：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務內容：分子生物學、免疫, 重組蛋白及ELISA相關、活性小分子化合物、高端化學、材料化學、細胞資源庫與培養(yǎng)相關、生命科學、天然產物 |
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