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[交流]
細胞凍存保種要注意哪些？
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1.密切觀察細胞的生長密度，當細胞密度即將達到其生長密度極限時進行換液，以便第二天進行保種； 2.消化前進行凍存液配制，切勿用培養(yǎng)基和血清重懸細胞后再加入DMSO，這樣會導致局部高濃度的DMSO對細胞產(chǎn)生損傷； 3.消化前預估細胞的數(shù)量，加入適量凍存液，以使細胞密度為1-2*10E6/ml，密度過高會導致凍存保護液不足，密度過低會導致凍存液對細胞有毒性； 4.梯度降溫盒必須提前復溫至室溫，切勿從-80℃取出即可使用，這樣會導致細胞全部死亡； 5.離心速度和時間依據(jù)具體細胞決定。 |
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