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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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運動病（也叫暈動�。﹦游锬Ｐ偷臉�(gòu)建與評價
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運動�。╩otion sickness，MS）是指乘坐運載工具時出現(xiàn)的以頭昏、眩暈、惡心、嘔吐、面色蒼白、出冷汗等一系列前庭和自主神經(jīng)反應(yīng)為主要臨床表現(xiàn)的疾病。運動病可發(fā)生于任何年齡，發(fā)病率較高，但其確切的發(fā)病機制至今尚不清楚。為探究運動病的病理生理學機制、篩選有效的抗運動病新藥，研究者建立了許多模擬人類運動病的試驗動物模型。 動物的選擇 暈動病動物模型主要有大鼠、小鼠、豚鼠、新西蘭家兔。 造模方法 1、頸部手術(shù)眩暈?zāi)Ｐ?br /> 頸性眩暈是一種以頸源性因素引起的暈眩為主的交感神經(jīng)癥狀，常表現(xiàn)為頭暈?zāi)垦�、步態(tài)不穩(wěn)、頸部僵直麻木。 造模方法1：選取試驗室SPF級SD雄性大鼠，剪斷頸后部肌肉組織，并切除C5~6棘突及韌帶，破壞C5~6關(guān)節(jié)囊，導(dǎo)致動靜力失衡及頸部失穩(wěn)而成功造成SD大鼠頸椎病模型。大鼠在失穩(wěn)后頸部血管痙攣、增生，影響頸部血流循環(huán)，進而導(dǎo)致骨質(zhì)增生，壓迫頸動脈而產(chǎn)生眩暈。在上下左右轉(zhuǎn)動大鼠后，觀察大鼠步態(tài)變化，以大鼠不能正常站立或移動，或出現(xiàn)搖晃、停滯不前、調(diào)轉(zhuǎn)方向移動認定為造模成功。 造模方法2：選用SD大鼠，麻醉后切開頸部皮膚，在不破壞皮下肌肉組織的前提下，對暴露出的右側(cè)頸動脈穿線結(jié)扎。術(shù)后，將造模成功的大鼠放入離心半徑為30cm、離心力為83. 85 × g的離心機中勻速旋轉(zhuǎn)30s，驟停，觀察大鼠的眩暈情況。 優(yōu)缺點：該方法較為經(jīng)典，但操作繁瑣，需要一定的動物外科學基礎(chǔ)，是臨床上研究抗缺血性眩暈藥物的最常用建模方法。 2、運動刺激眩暈?zāi)Ｐ?br /> 動物試驗中，加速旋轉(zhuǎn)和勻速旋轉(zhuǎn)均會引起試驗動物前庭植物神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)加強，表現(xiàn)為試驗動物的自發(fā)活動減少，運動速度遲緩，反應(yīng)遲鈍，精神萎靡等。 造模方法：選用昆明種小鼠，使用可調(diào)速眩暈產(chǎn)生儀，旋轉(zhuǎn)速度 0~ 440 r·min-1，自由可調(diào)。 優(yōu)缺點：此造模方法簡單易行，不需要復(fù)雜、昂貴的儀器，結(jié)果重復(fù)性高，造模成功率高，試驗采用小鼠作為試驗動物，成本低廉，飼養(yǎng)方便，是臨床上研究良性陣發(fā)性眩暈的常用模型。 3、耳源性刺激眩暈?zāi)Ｐ?br /> 對試驗動物外耳的刺激，能改變淋巴液的濃度，使半規(guī)管的淋巴液產(chǎn)生流動，淋巴液流動產(chǎn)生的靜水力會刺激壺腹嵴毛細胞，神經(jīng)激沖動信號會經(jīng)過前庭神經(jīng)、前庭核、內(nèi)側(cè)縱束神經(jīng)通路作用動物大腦，使動物產(chǎn)生眩暈。 造模方法：將豚鼠取耳后下切口，吸引器打開前庭并破壞、吸除耳石器及壺腹嵴等。于前庭植入消毒后的明膠海綿。通過不斷給豚鼠外耳增加壓力，是豚鼠出現(xiàn)反復(fù)發(fā)作性的眩暈。 優(yōu)缺點：該模型操作簡單，引起眩暈的原理明確、可靠、發(fā)作時間和周期可控。是臨床上研究耳源性反復(fù)發(fā)作性眩暈的首選造模手段。 4、注射硬化劑眩暈?zāi)Ｐ?br /> 造模方法1：選用健康清潔級新西蘭家兔，高脂飲食飼養(yǎng)后，注射硬化劑(消痔靈注射液)，注射位置為左側(cè)第2~6頸椎橫突附近軟組織，使左側(cè)椎動脈損害、肌肉纖維化，達到降低椎動脈血流，同時破壞頸椎動力平衡，經(jīng)多普勒、腦干聽覺誘發(fā)電位和病理學檢查證實模型的可行性，待造模成功后，病理結(jié)果顯示注射硬化劑區(qū)域組織出現(xiàn)廣泛瘢痕修復(fù)，最終引起家兔頸椎動力平衡失調(diào)，造成動物眩暈?zāi)Ｐ汀?br /> 優(yōu)缺點：采用大腦動脈環(huán)完整的新西蘭家兔制作該模型，更能接近臨床病理變化過程。 造模方法2：選用日本大耳家兔，每日注射5%的硬化劑(油酸氨基乙酸)的注射液10 ml，注射到家兔的頸椎橫突附近的軟組織中，并于接下來幾周每周重復(fù)操作1次，HE 染色發(fā)現(xiàn)日本大耳兔頸部組織變性、退變，提示造模成功。 優(yōu)缺點：該模型更貼近臨床上頸部狹窄引起的眩暈，模型方便操作，造模成功率較高。是臨床上替代頸部手術(shù)眩暈?zāi)Ｐ偷牧己迷炷Ｊ侄巍?br /> 5、飛行變壓眩暈?zāi)Ｐ?br /> 變壓眩暈是一種急性發(fā)作的眩暈，外界壓力的驟然變化，而中耳由于變化的滯后導(dǎo)致其相對于外界的高壓，出現(xiàn)幾秒至幾分鐘的自主神經(jīng)代償及相關(guān)的前庭癥狀，突出表現(xiàn)為變壓性眩暈。 造模方法：選用小鼠作為試驗動物，在低壓條件下，單次或多次頭部震蕩小鼠，會引起小鼠耳囊內(nèi)的耳蝸脫離，在壓力快速變化時，產(chǎn)生眩暈。該模型適用于由于水平位置快速變化引起中、外耳相對壓力過高產(chǎn)生的眩暈，與現(xiàn)實中飛行員由于飛行器航母彈射、快速爬升、緊急迫降而引起的眩暈相近。 動物眩暈相關(guān)評價指標 1、平衡木試驗 平衡木試驗是研究動物的平衡能力、檢測動物的運動協(xié)調(diào)性的試驗，對認識動物小腦的本質(zhì)和運動平衡能力具有極其重要的意義，是研究小腦、運動協(xié)調(diào)、學習記憶、眩暈等重要的醫(yī)學手段。 試驗方法：速運動后，迅速將其放置于木桿上，觀察大鼠通過木桿時的能力。平衡木試驗評分標準：大鼠不能在木桿上移動，或搖晃、停滯、調(diào)轉(zhuǎn)方向，僅稍有移動而不能通過木桿計0分;大鼠在木桿上搖晃、停滯、調(diào)轉(zhuǎn)方向，有明顯移動，甚至能通過木桿，計1. 5分;大鼠較順利行走，通過木桿，計3分。該試驗評價指標能準確地觀察到大鼠的眩暈程度，并量化一些相關(guān)因素對于眩暈的影響，適用于大鼠和小鼠等小型嚙齒類動物。 2、跳臺試驗 跳臺試驗是評價動物對藥物及其他給予的干預(yù)后的神經(jīng)行為學中一個測試現(xiàn)象較為明顯的試驗。 試驗方法：將產(chǎn)生眩暈的小鼠置于電擊反射儀中，給以電擊，記錄小鼠逃避電擊反射時間記為潛伏期。正常牢固建立電擊逃避反射的小鼠潛伏期為零，而經(jīng)過旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生眩暈的小鼠的潛伏期隨著眩暈程度而相應(yīng)地延長。數(shù)據(jù)穩(wěn)定所測逃避潛伏期能較好地反映動物眩暈時間的長短，能將眩暈的持續(xù)時間和嚴重程度進行量化，便于比較眩暈改善情況。由于跳臺儀器本身大小的限制，該評價指標適用于大鼠和小鼠等小型嚙齒類動物。 3、自發(fā)活動試驗 自發(fā)活動試驗是觀察研究試驗動物神經(jīng)精神變化、進入開闊環(huán)境后的各種行為的試驗。 試驗方法：將產(chǎn)生眩暈的小鼠置于自發(fā)活動儀中，測定小鼠在 10 min 內(nèi)總路程和平均速度。這種自發(fā)活動減少的行為學的表現(xiàn)與眩暈發(fā)生后的精神抑郁、反應(yīng)遲鈍的一個行為學指標，間接反映了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的變化，可作為一種判斷暈動病發(fā)生的特異性指標。該評價指標只適用于小鼠等活動較為亢進的動物。 4、異食行為試驗 嚙齒類動物由于自身不具有嘔吐反射中樞，在受到前庭刺激時，不會出現(xiàn)人類眩暈時的惡心嘔吐癥狀，通常表現(xiàn)為異食行為。大鼠在受到旋轉(zhuǎn)刺激后可以產(chǎn)生異食癖行為，表現(xiàn)為對無營養(yǎng)的高嶺土（一種非金屬礦產(chǎn)）的攝入量增加。 試驗方法：有試驗研究證實大鼠異食高嶺土行為的發(fā)生與人的嘔吐發(fā)生的機制相似，因此可以采用大鼠在旋轉(zhuǎn)刺激前后的高嶺土攝入量的變化來反映大鼠所產(chǎn)生的運動病的嚴重程度。一般在旋轉(zhuǎn)刺激結(jié)束后3d內(nèi)大鼠的高嶺土攝入量與對照組有顯著的統(tǒng)計學差異，但個體差異對結(jié)果影響仍然較大，需同時進行其他指標的評判加以輔證。該評價指標適用于評價動物眩暈時無嘔吐反應(yīng)，表現(xiàn)為異食行為嚙齒類動物。 總結(jié) 近年來，隨著科學技術(shù)的不斷進步，人類對于眩暈的機制有了更為深刻的了解，同時也建立了多種動物眩暈?zāi)Ｐ停侵两襁�沒有一種抗眩暈藥物是利用動物模型篩選出來的，臨床上正在應(yīng)用的藥物，多來自循證醫(yī)學的臨床實踐。目前學界內(nèi)亟待建立一種公信力較高的眩暈?zāi)Ｐ�，能夠系統(tǒng)地闡釋眩暈發(fā)病機制，用以發(fā)現(xiàn)、篩選、評價抗眩暈藥物，為新藥研發(fā)提供新的思路。 |
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