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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)
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1、腫瘤細(xì)胞最好經(jīng)過(guò)饑餓處理，并且小室上下培養(yǎng)基的FBS有濃度差，以保證細(xì)胞可以穿透基質(zhì)膠。 2、鋪細(xì)胞要均勻，濾膜底部不能產(chǎn)生氣泡，否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞染色不均勻，或者局部細(xì)胞無(wú)法穿透。 3、侵襲實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞密度比較大，不同腫瘤細(xì)胞的接種密度、培養(yǎng)時(shí)間不同，需要實(shí)驗(yàn)摸索。細(xì)胞太少，遷移不過(guò)去；細(xì)胞太多，可能導(dǎo)致正常組和實(shí)驗(yàn)組無(wú)差異。 4、首次做實(shí)驗(yàn)需要用正常的細(xì)胞摸索合適的細(xì)胞密度和培養(yǎng)時(shí)間，確定之后再加實(shí)驗(yàn)組，同時(shí)如果條件允許，設(shè)置一組已知高遷移性的細(xì)胞作陽(yáng)性對(duì)照。 5、注意細(xì)胞小室內(nèi)外培養(yǎng)基的比例，不要使小室外培養(yǎng)基超過(guò)小室內(nèi)培養(yǎng)基液面。 6、觀察細(xì)胞時(shí)一定要擦去小室內(nèi)部貼在膜上的細(xì)胞。 |
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