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專業(yè): 實驗動物學

[交流] 牙周炎動物模型

牙周炎(periodontitis)是一種常見的牙齒周圍組織即牙齦、牙槽骨、牙周膜和牙骨質破壞的慢性感染性疾病，目前普遍認為菌斑微生物及其產(chǎn)物在局部的堆積和浸潤是牙周炎發(fā)生、發(fā)展的關鍵因子。隨著醫(yī)學知識的普及和人們對口腔健康重視程度的加深，牙周炎作為一項發(fā)病率極高且影響廣泛的口腔疾病，其防治工作迫在眉睫。建立正確合理的動物模型，有利于深入研究影響牙周炎發(fā)生發(fā)展的關鍵因素，為疾病的控制、藥物研發(fā)提供思路，從而開展積極有效的臨床防治工作。

動物的選擇

一般選擇2~4月齡的SD大鼠和Wistar大鼠，后者性情更為溫順些。因大鼠繁殖率較高，飼養(yǎng)成本較低，有足夠的數(shù)量進行研究和統(tǒng)計分析，又因其生命周期短，適應能力及抗病能力強，可快速誘發(fā)疾病，是目前應用最廣泛的動物，尤其適用于測試各種藥劑緩解炎癥的功效。

但大鼠牙周病發(fā)病率遠低于人，且牙齒小，對操作和觀察有一定影響，同時因大鼠的牙齒能持續(xù)不斷的生長，只適合短時程的實驗研究。

造模方法

一、結扎線法
目前單純利用該法構建動物牙周炎模型的技術已相當成熟，在各種牙周病的研究中均得到廣泛使用。

造模方法：

選取SD大鼠，大鼠用10％水合氯醛麻醉，麻醉劑量0.2mL/100g，然后用尖頭探針將第二磨牙的牙齦分離，用縫線在齦溝內結扎，15d后進行組織學觀察，確定建模是否成功。

結扎材料有尼龍線、細絲線、橡皮圈、正畸用鋼絲等，其中正畸不銹鋼絲結扎的效果最好，成功率更高。
在建模過程中要定期檢查結扎材料是否脫落，或根據(jù)需要進行更換。
此方法在結扎時可撥離牙頸處包裹的牙周組織，從而造成輕微的機械性損傷。

二、高糖黏性食料喂飼聯(lián)合其他方法

采用高糖低蛋白飼料飼養(yǎng)時，實驗動物會有牙周袋產(chǎn)生、牙槽骨吸收和炎性細胞浸潤等病理變化，但單獨使用此法建模效果一般，且耗時較長。現(xiàn)階段，高糖黏性食料喂飼常與其他手段聯(lián)合使用，輔助誘導動物牙周炎的形成，或用于伴糖尿病牙周炎動物模型的研究，可更好地模擬臨床上相應患者的發(fā)病機制。

造模方法：

Wistar大鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉。
用牙科探針分離第一、二磨牙牙間間隙，采用直徑為0.2mm的正畸不銹鋼絲結扎大鼠雙側上頜第一磨牙牙頸部，用持針器夾持結扎絲從大鼠上頜雙側第一磨牙遠中腭側進入，環(huán)繞上頜第一磨牙一周后，在腭側偏近中處結扎固定，結扎絲末端保留3mm回彎置于齦下，防止結扎絲劃傷口腔內軟組織，且不損傷牙齦的結合上皮。
術后嚴密觀察大鼠的狀態(tài)，從實驗當天起喂食糖水，12小時后進食，每天高糖飲食喂養(yǎng)( 飲用水為10%葡萄糖水，飼料為10%葡萄糖水浸泡變軟的常規(guī)飼料。術后每周檢查牙周結扎情況，并觀察牙周組織的狀況。

三、注射脂多糖（liposaccharide, LPS）

造模方法：

選取Wistar大鼠，大鼠下頜第二磨牙牙齦內單獨注射LPS 10μg/μl, 并于第3、7、10天分批處死動物，取下頜骨分別進行組織學和免疫細胞化學分析。

模型驗證：

單獨注射LPS, 在第7天和第10天能夠引起典型的牙齦和牙周炎癥：滲出液明顯增多, 結合上皮根方遷移, 牙槽間隔的骨喪失, 破骨細胞活躍。在注射后的第10天, 下頜骨的兩側均可見到顯著的骨喪失趨勢。

總結

雖然牙周炎動物模型為牙周炎疾病提供了大量重要數(shù)據(jù)，但其研究結果只能提供某種新型藥物安全性和潛在功效的初步信息，不能直接將這些結果等同于人類牙周炎的結果。另外，全身因素導致的個體差異很難解釋，一些口腔衛(wèi)生習慣差的群體并未表現(xiàn)出牙周炎癥，而某些口腔菌斑較少的人卻患上嚴重的牙周炎。真正能夠模擬人類牙周病自然發(fā)病機制、實用且重復性高的模型還亟待進一步探索和研發(fā)。

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1樓 2023-08-31 14:46:06

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