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科研小努力新蟲 (小有名氣)
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[交流]
無縫克隆的原理
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在載體末端和引物末端應(yīng)具有15-25個同源堿基（同源臂）。通過T5核酸外切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶，三種酶同時發(fā)揮功能，從而達(dá)到單片段或多片段與載體連接的技術(shù)。 T5核酸外切酶：5‘→3’端消化DNA片段， 形成粘性末端；DNA聚合酶：填補(bǔ)缺口； DNA連接酶：兩條DNA 單鏈黏合起來。 |
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