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微生物實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基配制方法
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1.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于細(xì)菌培養(yǎng)） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。 2.高氏1號(hào)培養(yǎng)基(用于放線菌培養(yǎng)) 可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，F(xiàn)eSO4•7H2O0.01g，水1000mL，pH7.4～7.6。配制時(shí)注意：可溶性淀粉要先用冷水調(diào)勻后再加入到以上培養(yǎng)基中。 3.馬丁氏（Martin）培養(yǎng)基（用于從土壤中分離真菌） K2HPO41g，MgSO4•7H2O0.5g，蛋白胨5g，葡萄糖10g，1/3000孟加拉紅水溶液100mL，水900mL，自然pH，121℃濕熱滅菌30min。待培養(yǎng)基融化后冷卻55～60℃時(shí)加入鏈霉素(鏈霉素含量為30μg/mL)。 4.馬鈴薯培養(yǎng)基(PDA)(用于霉菌或酵母菌培養(yǎng)) 馬鈴薯(去皮)200g，蔗糖(或葡萄糖)20g，水1000mL，配制方法如下： 將馬鈴署去皮，切成約2c㎡的小塊，放入1500mL的燒杯中煮沸30min，注意用玻棒攪拌以防糊底，然后用雙層紗布過濾，取其濾液加糖，再補(bǔ)足至1000mL，自然pH，霉菌用蔗糖，酵母菌用葡萄糖。 5.察氏培養(yǎng)基(蔗糖硝酸鈉培養(yǎng)基)(用于霉菌培養(yǎng)) 蔗糖30g，NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4•7H2O0.5g，KCl 0.5g，F(xiàn)eSO4•7H2O0.1g，水1000mL，pH7.0～7.2。 6.Hayflik培養(yǎng)基(用于支原體培養(yǎng)) 牛心消化液(或浸出液)1000mL，蛋白胨10g，NaCl 5g，瓊脂15g，pH7.8～8.0，分裝每瓶70mL，121℃濕熱滅菌15min，待冷卻至80℃左右，每70mL中加入馬血清20mL，25%鮮酵母浸出液10mL，15醋酸鉈水溶液2.5mL，青霉素G鉀鹽水溶液(20萬單位以上)0.5mL，以上混合后傾注平板。 *注意：醋酸鉈是極毒的藥品，需特別注意安全操作。 7.麥?zhǔn)?McCLary)培養(yǎng)基(醋酸鈉培養(yǎng)基) 葡萄糖0.1g, KCl 0.18g，酵母膏0.25g，醋酸鈉0.82g，瓊脂l.5g，蒸餾水l00mL。溶解后分裝試管，1l5℃濕熱滅菌15min。 8.葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(用于V.P.反應(yīng)和甲基紅試驗(yàn)) 蛋白胨0.5g，葡萄糖0.5g，K2HPO4 0.2g，水100mL，pH7.2，1l5℃濕熱滅菌20min。 9.蛋白胨水培養(yǎng)基(用于吲哚試驗(yàn)) 蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.2～7.4，121℃濕熱滅菌20min。 10.糖發(fā)酵培養(yǎng)基(用于細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)) 蛋白胨0.2g，NaCl 0.5g，K2HPO4 0.02g，水100mL，溴麝香草酚藍(lán)(1%水溶液)0.3mL，糖類lg。分別稱取蛋白胨和NaCl溶于熱水中，調(diào)pH至7.4，再加入溴麝香草酚藍(lán)(先用少量95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)，加入糖類，分裝試管，裝量4～5cm高，并倒放入一杜氏小管(管口向下，管內(nèi)充滿培養(yǎng)液)。115℃濕熱滅菌20min。滅菌時(shí)注意適當(dāng)延長(zhǎng)煮沸時(shí)間，盡量把冷空氣排盡以使杜氏小管內(nèi)不殘存氣泡。常用的糖類，如葡萄糖、蔗糖、甘露糖、麥芽糖、乳糖、半乳糖等(后兩種糖的用量常加大為1.5%)。 11.RCM培養(yǎng)基(強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基)、(用于厭氧菌培養(yǎng)) 酵母膏3g，牛肉膏l(xiāng)0g，蛋白胨10g，可溶性淀粉lg，葡萄糖5g, 半胱氨酸鹽酸鹽0.5g，NaCl 3g，NaAc 3g，水l000mL，pH8.5，刃天青3mg/L，l2l℃濕熱滅菌30min。 12.TYA培養(yǎng)基(用于厭氧菌培養(yǎng)) 葡萄糖40g，牛肉膏2g，酵母膏2g，胰蛋白胨(bacto-typetone)6g，醋酸銨3g，KH2PO4 0.5g，MgSO4•7H2O0.2g，F(xiàn)eSO4•7H2O0.01g，水1000mL， pH6.5，121℃濕熱滅菌30min。 作者：畢合生物 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物（www.bihebio.com)提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
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