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會飛的豬tao新蟲 (初入文壇)
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膠體金免疫層析 已有3人參與
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各位大佬，我想問一下就是我最近組裝的試紙條，我用的是競爭法，用同一批試紙條做空白對照時侯有的出現(xiàn)假陽，有的T線強(qiáng)于C線，而且這種現(xiàn)象很頻繁，不是個別現(xiàn)象，劃線的時候劃的也很均勻，然后不同T線濃度的試紙條做空白對照的時候也會有假陽出現(xiàn)，用金標(biāo)抗體試以前組裝的試紙條就沒有出現(xiàn)過假陽的情況，各位大佬求指點(diǎn) @dut_ameng @xiejf @nowitzki_ci @神魔流轉(zhuǎn) @wulishi8 @yswyx 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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謝謝大哥。1、我的封閉溶劑是用的10％的BSA，終濃度1%，我之前合成的膠體金是現(xiàn)在膠體金溶液濃度的10倍左右，但是我現(xiàn)在合成金標(biāo)抗體時加的封閉溶液體積沒變，我懷疑可能封閉溶劑過量了，2、如果減少封閉溶液量不行我再換換其他種類的封閉溶劑試試，3、還有我的試紙條在做空白時有時候會出假陽，但是假陽有但沒有特別夸張，我還想著重新?lián)Q一批次的T線抗原試試 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2023-08-30 00:28:48
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9樓2023-09-10 11:14:52
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【答案】應(yīng)助回帖
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1.調(diào)整膠體金上面的抗體含量 2. 調(diào)整T線濃度 3. 更換樣品墊緩沖配方 僅供參考！ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2023-08-26 08:21:19
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謝謝大哥指點(diǎn)，1.金上抗體量是已經(jīng)優(yōu)化好的最少抗體量，離心復(fù)溶后沒有死金，2.我也試了不同T線濃度做了空白也會偶爾出現(xiàn)假陽，樣品墊我買來沒有經(jīng)過任何處理，3.我用現(xiàn)在合成的金標(biāo)抗體上樣到以前組裝的試紙條(樣品墊沒有經(jīng)過任何處理)，做空白全是正常的 我想可不可能是劃線機(jī)器的問題，我這種結(jié)果很像劃線的時候T線抗原分布不均導(dǎo)致的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2023-08-26 15:08:14
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就您的問題： 1.T線C線是機(jī)器噴的還是手工畫？ 2.金標(biāo)墊、樣品墊可以處理下，增加緩沖能力 3.您的反應(yīng)體系其他免疫方法是否配對？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2023-08-27 08:15:02
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5樓2023-08-27 16:55:44
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2、我這個沒有金標(biāo)墊，只有樣品墊，樣品墊處理一般是用peg10000嗎 3、現(xiàn)在的抗原抗體是之前用的，之前的實(shí)驗(yàn)已經(jīng)做好了，沒有問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2023-08-27 16:58:05
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機(jī)器劃線應(yīng)該沒問題 其他方法配對成功說明抗原抗體結(jié)合沒問題 出現(xiàn)假陽性應(yīng)該是： 1.膠體金上面抗體過多或封閉不到位，您已降低抗體含量，可以調(diào)整封閉方案 2.樣品墊不僅有PEG成份，還有離子強(qiáng)度和pH兩因素，提供抗原抗體反應(yīng)環(huán)境 3.納米金顆粒出現(xiàn)變性，無差異吸附蛋白，導(dǎo)致假陽性 供您參考 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2023-08-28 16:32:54
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10樓2023-09-13 23:30:08
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