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質(zhì)粒載體和病毒載體有哪些異同?
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從理論上來說,載體的構(gòu)建沒有太大的技術難度,但是它的成功與否有時候是一個玄學的過程,有一定程度上的運氣成分,有時候“胡亂”操作一通反而莫名其妙地構(gòu)上去而且轉(zhuǎn)化成功了。那么在具體的應用中,質(zhì)粒載體和病毒載體有哪些異同? 01 進入細胞方式不一樣 質(zhì)粒通過轉(zhuǎn)染進入目的細胞,病毒通過感染進入目的細胞,特異性更強,且效率更高。 02 所搭載的序列形式及其發(fā)揮功能的方式可能不一樣 質(zhì)粒DNA所搭載的目的序列是DNA,并且DNA通常需要進入細胞核才能行使相應的功能;病毒載體搭載的序列可以是DNA,也可以是RNA,而RNA序列通常不需要入核行使功能,并且如果是進行宿主基因組的同源重組,病毒載體效率更高。 03 包裝、提純方式不一樣 質(zhì)粒通常是在原核細胞內(nèi)進行擴增后提純;病毒載體通常在真核細胞內(nèi)包裝后逐步擴大培養(yǎng)后裂解細胞/收集上清后提純獲得。 04 保存方式不一樣 質(zhì)粒通常穩(wěn)定性非常好,對溫度不敏感; 病毒不一樣,一般需要低溫冷凍保存對溫度很敏感,反復凍融對活力影響也非常大。 05 在疫苗應用不同 質(zhì)粒DNA作為DNA疫苗的載體,通常免疫原性較低,需要使用脂質(zhì)體或者電擊槍用于增強DNA進入細胞; 病毒載體疫苗免疫原性較好,通常很容易誘導較強的抗體和T細胞免疫原性,但往往受限于預存免疫。 |
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